Ппу 1: Физические свойства ППУ-1

Содержание

Заливочные системы ППУ — Elastopor H 2310/1

  • Рекомендуем Wannate PM-200 Изоцианат — компонент Б Полиизоцианат ПИЦ полимерный МДИ
    Цвет: Корич-ый
    NCO: 30.5~32.0
    Вязкость: 200±50
    Плотность: 1.25
    Изготовитель: Китай
    Вес: 250 кг.

    76 568 р  | 0 р/кг.

    Купить
  • Рекомендуем Elastocoat C 6335/101

    Полимочевинный — напыляемый эластомер Ароматический. А:Б — 1:1

    249 475 р  | 0 р/кг.

    Купить
  • Рекомендуем Elastopave C 6551/102 для гравия

    Полиуретановое связующее — покрытие, праймер. 100:84

    189 000 р  | 0 р/кг.

    Купить
  • Новинка Рекомендуем Elastospray 1601/18

    Легкая — напыляемая открытоячеистая система компонентов ППУ. А:Б — 1:1

    143 350 р  | 0 р/кг.

    Купить
  • Новинка Рекомендуем Elastospray 1612/48

    Жесткая — напыляемая закрытоячеистая система компонентов ППУ. А:Б — 1:1

    152 750 р  | 0 р/кг.

    Купить
  • Рекомендуем Elastospray 1612/19 Зимняя до 0ºС

    Жесткая — от 0 °С напыл-я закрытоячеистая система компонентов ППУ. А:Б — 1:1

    161 210 р  | 0 р/кг.

    Купить
  • Новинка Рекомендуем Elastan, Iso 136/49 для резиновой крошки

    Полиуретановое связующее — покрытие травмобезопасное

    66 400 р  | 0 р/кг.

    Купить
  • Новинка Рекомендуем Elastospray 1612/30

    Жесткая — напыляемая закрытоячеистая система компонентов ППУ. А:Б — 1:1

    193 650 р  | 0 р/кг.

    Купить
  • Новинка Elastospray 1612/49

    Жесткая — напыляемая закрытоячеистая система компонентов ППУ. А:Б — 1:1

    161 210 р  | 0 р/кг.

    Купить
  • Рекомендуем Elastospray 1612/34

    Жесткая — напыляемая закрытоячеистая система компонентов ППУ. А:Б — 1:1

    161 210 р  | 0 р/кг.

    Купить
  • Рекомендуем Elastospray 1622/29

    Жесткая — напыляемая закрытоячеистая система компонентов ППУ. А:Б — 1:1

    199 000 р  | 0 р/кг.

    Купить
  • Новинка Рекомендуем Elastopor H 2401/100 Заполнение пустот

    Жесткая — Инжекционная открытоячеистая система компонентов ППУ. А:Б — 1:1

    138 720 р  | 0 р/кг.

    Купить
  • Новинка Рекомендуем Elastopor H 1701/20 Заполнение пустот

    Жесткая — Инжекционная закрытоячеистая система компонентов ППУ. А:Б — 1:1

    141 480 р  | 0 р/кг.

    Купить
  • Стальные трубы ППУ ПЭ (тип 1). Трубы ППУ в полиэтиленовой оболочке.

    Наш завод производит стальные трубы ППУ ПЭ (тип 1) по ГОСТ 30732-2006.

    У нас Вы можете купить стальные трубы ППУ ПЭ (тип 1) по цене завода-производителя.

    Обращайтесь, будем рады сотрудничеству!

    Прайс-лист на стальные трубы ППУ ПЭ (тип 1).

    Цены на нашу продукцию приведены в разделе прайс-лист. Для уточнения цены на стальные трубы ППУ ПЭ (тип 1) обращайтесь к нашим менеджерам, или воспользуйтесь формой запроса.

    Номенклатура труб ППУ ПЭ (тип 1)

    • d,мм — Наружный диаметр стальной трубы;
    • s,мм — Толщина стенки стальной трубы ;
    • L1,мм — Длина свободного конца стальной трубы;
    • D,мм — Диаметр полиэтиленовой оболочки;
    • S,мм — Толщина полиэтиленовой оболочки;
    • Sи,мм — Толщина слоя теплоизоляции;
    • М,кг — Приблизительная масса 1 п.м. трубы;
    Обозначение по ГОСТ d,мм s,мм L1,мм D,мм S,мм Sи,мм М,кг

    Труба Cт 57 x 3,5 -1- ППУ ПЭ

    57

    3,5

    150

    125

    2,5

    31,5

    6,45

    Труба Cт 76 x 3,5 -1- ППУ ПЭ

    76

    3,5

    150

    140

    3,0

    29,0

    8,3

    Труба Cт 89 x 4,0 -1- ППУ ПЭ

    89

    4,0

    150

    160

    3,0

    32,5

    9,8

    Труба Cт 108 x 4,0 -1- ППУ ПЭ

    108

    4,0

    150

    180

    3,0

    33,0

    13,0

    Труба Cт 133 x 4,5 -1- ППУ ПЭ

    133

    4,5

    150

    225

    3,5

    42,5

    16,8

    Труба Cт 159 x 4,5 -1- ППУ ПЭ

    159

    4,5

    150

    250

    3,9

    41,5

    22,3

    Труба Cт 219 x 6,0 -1- ППУ ПЭ

    219

    6,0

    150

    315

    4,9

    42,0

    38,9

    Труба Cт 273 x 6,0 -1- ППУ ПЭ

    273

    6,0

    210

    400

    6,3

    57,0

    58,1

    Труба Cт 325 x 7,0 -1- ППУ ПЭ

    325

    7,0

    210

    450

    7,0

    55,5

    69,5

    Труба Cт 377 x 8,0 -1- ППУ ПЭ

    377

    8,0

    210

    500

    7,8

    53,7

    81,2

    Труба Cт 426 x 8,0 -1- ППУ ПЭ

    426

    8,0

    210

    560

    8,8

    58,2

    93,9

    Труба Cт 530 x 8,0 -1- ППУ ПЭ

    530

    8,0

    210

    710

    11,0

    78,9

    125,6

    Труба Cт 630 x 10,0 -1- ППУ ПЭ

    630

    10,0

    210

    800

    13,0

    72,5

    164,7

    * Изготавливаем трубы и фасонные изделия из труб других диаметров и с другой толщиной стенки.

    Потолочный проходной узел ППУ модель №1 (0.5 оцинкованный 210, 430 0.5 )

    Код товара: 185029

    В наличии до 10 шт.

    Диаметр

    210 мм

    Материал

    нержавеющая сталь

    Толщина стали

    0,5 мм

    Высота

    430 мм

    Потолочный проходной узел Н 430 ― специальный монтажный элемент дымоотводящей системы, используемый для прокладки дымохода через потолочное перекрытие или стену. При установке этой детали обеспечивается дополнительная пожаробезопасность. Корпус и основание потолочного проходного узла выполнены из высокопрочной нержавеющей стали, поэтому устойчивы к износу и не подвержены деформации. Для крепления к потолку или стене предусмотрены специальные крепежные отверстия, которые облегчают установку детали.

    Корпус со стенками толщиной 0,5 мм подходит для использования с дымоходом отопительных печей длительного горения.

    На товар предоставляется гарантия сроком до 12 лет. Страна-производитель ― Россия.

    Цена указана за 1 шт.

     

    Модульный диван Престиж 1 (ППУ HR) в Нижнем Новгороде приобрести с доставкой

    Характеристики модульный диван Престиж 1 (ППУ HR)

    КатегорияМодульные диваны
    Ширина 380 см
    Глубина 215 см
    Высота 103 см
    Ширина спального места 180 см
    Длина спального места 380 см
    Механизм трансформации Пума
    СтильСовременный
    Тип обивкиТкань, Кожа, Эко кожа, Замша
    Наполнитель дивана ППУ HR высокоэластичный
    Производитель Россия
    Гарантия производителя 18 месяцев
    Вес / ОбъемРасчитать для доставки

    Модули модульный диван Престиж 1 (ППУ HR)

    Выбрать основную ткань

    Выбрать ткань-компаньон

    Посмотреть сочетание тканей

    Информация о доставке модульный диван Престиж 1 (ППУ HR)

    Способ доставкиОписание
    СамовывозБесплатно — самостоятельный вывоз с пункта выдачи.

    Пункт выдачи расположен по адресу г. Нижний Новгород, ул. Вторчермета, 1/к. 2. Режим работы:

    пн — пт, c 08:00 по 20:00, сб, c 09:00 по 15:00.

    Всего пунктов: 6 получения готовой мебели в России (посмотреть)

    Доставка до подъезда дома из пункта выдачиВремя доставки согласуется дополнительно. Выгрузка из машины и подъём на нужный этаж осуществляется Вами лично, либо за дополнительную плату после согласования с менеджером.
    Доставка по РФРассчитывается индивидуально после оформлении заказа на сайте
    *Дополнительную информацию о том, как купить модульный диван Престиж 1 (ППУ HR) в Нижнем Новгороде уточняйте у нашего менеджера по телефону +7 831 231-21-02

    Умка ППУ 1,2

    Название:

    Артикул:

    Текст:

    Выберите категорию: Все Мебель для дачи » Ротанговая мебель » Столы,стулья Мебель для кухни » Кухни готовый вариант » Кухни модульные »» Лондон ИН »» Гренада ИН »» Мокко ИН »» Олива ДСВ »» Капля ДСВ »» Гранд ДСВ »» Монако ДСВ »» Капри ДСВ »» Барселона ИН »» Олива ИН »» Виста ИН »» Вита ДСВ »» Империя ДСВ »» Лофт ДСВ »» Ксения СМ »» Юлия СМ »» Модена СМ »» Дина Принт СМ »» Дина ЛДСП СМ »» Мария СМ »» Бетон ИН »» Лофт ЛДСП ИН »» Тито ДСВ »» Опера ДСВ »» Гарда ДСВ »» Квадро ДСВ »» Сонома ЛДСП ИН »» Шагрень ИН »» Кёльн ИН »» Бруклин ИН »» Ройс ДСВ »» Скала ДСВ »» Дакота ЛДСП СМ »» Кремона СМ »» Линда МДФ СМ »» Глория МДФ СМ »» Риволи ДСВ » Столешницы » Мойки,сушки,смесители » Кухонные уголки и обеденные группы » Столы »» Столы кухонные »» Столы кухонные раздвижные »» Столы обеденные »» Столы книжки » Стулья,табуреты » Стеновые панели » Комплект столешница + стеновая панель Мебель для прихожей » Прихожие-готовое решение » Обувницы,банкетки » Прихожие модульные »» Вега »» Иннэс 2 »» Машенька »» Ева МФ »» Джаз АСТ »» Белла МФ »» Иннэс-6 МДФ »» Иннэс-6 Рамка »» Бриз АСТ »» Ронда ДСВ »» Ненси МФ » Вешалки Мебель для гостиной » Гостиные готовое решение » Гостиные модульные »» Ненси МДФ ГОР »» Марта-15 ИН »» Ронда ДСВ »» Лира ИН »» Асти СМ »» Софи ДСВ »» Макарена ЛДСП СМ »» Афина СМ »» Женева NEW МФ »» Оскар МФ »» Анталия МДФ ГОР »» Марта-20 ИН »» Прага ДСВ »» Асти ДСВ »» Ненси МФ »» Ким МФ »» Престиж-1 МФ »» Престиж-2 МФ »» Престиж МФ »» Фортуна МФ »» Ненси New МФ »» Терра МФ »» Мадера МФ »» Рио МФ »» Квадро МФ »» Белла МФ »» Принцесса »» Марсель АСТ »» Марли ДСВ »» Парма МФ »» Аванта МФ »» Эколь МФ »» Асти МФ »» Алтея МФ Мебель для детской » Детские готовое решение » Детские модульные »» Максимус »» Грэмми »» Ки-Ки »» Бриз »» Колибри »» Симба СМ »» Неаполь МФ »» Юниор-2 МФ »» Вега МФ »» Юниор-1 МФ »» Принцесса »» Юнга »» Радуга ДСВ »» Вега New »» Юниор-3 МФ »» Смайл ММ »» Сканди »» Ненси МДФ »» Анталия МДФ »» Лайт ГОР »» Миа СМ » Кровати для детской » Матрасы для детской Мебель для спальни » Спальни модульные »» Ненси МДФ »» Вегас МДФ »» Юнона »» Ронда ИН »» Бася СМ »» Кэт 6 МДФ »» Ронда ДСВ »» Виктория СМ »» Леси »» Анталия МДФ »» Вегас СМ »» Софи »» Валенсия ЛДСП СМ »» Натали МФ »» Мария МФ »» Александрина МФ »» Гармония МФ »» Афина МФ »» Афина-1 МФ »» Ким МФ »» Ника МФ »» Ненси МФ »» Жасмин МФ »» Валенсия МДФ »» Принцесса »» Грация МФ »» Престиж-1 МФ »» Престиж-2 МФ »» Престиж МФ »» Фортуна МФ »» Каролина МФ »» Вояж МФ »» Медина МДФ СМ »» Гармония СМ »» Сальма СМ »» Квадро 1,2 АСТ »» Милана МДФ ГОР »» Марсель АСТ »» Марли ДСВ »» Магнолия МФ »» Ненси New МФ »» Паола ЛДСП СМ Шкафы-купе Шкафы распашные Пеналы Шкафы угловые Стеллажи Антресоли,полки Зеркала Комоды,тумбы Макияжные столики Пуфы Матрасы » Защитные чехлы для матрасов Прикроватные тумбы Столы письменные,компьютерные Офисные кресла,стулья Мягкая мебель Журнальные столики Кровати односпальные Кровати полутораспальные Кровати двухспальные

    Производитель: ВсеКитайМалайзияРоссияРоссия,г. ВолгодонскРоссия,г. КузнецкРоссия,г. Ростов на ДонуРоссия,г. УльяновскРоссия,г.Пенза

    Новинка: Вседанет

    Спецпредложение: Вседанет

    Результатов на странице: 5203550658095

    Найти

    Заполнение пустот пенополиуретаном (ППУ)

    Рис. Заполнение воздушного зазора ППУ

    Заливка пенополиуретана (Что такое пенополиуретан — ППУ) в межстеновые пустоты является одним из самых эффективных способов утепления дома или коттеджа на любом этапе строительства или эксплуатации здания. Специальные компоненты для заливки позволяют полностью заполнить пенополиуретановым утеплителем имеющиеся воздушные полости, а также устранить все мельчайшие трещины и зазоры в кирпичной или иной кладке.

    В настоящее время облегченная (колодцевая) кладка является распространенным видом экономичного возведения кирпичных стен при строительстве малоэтажных зданий. В средней полосе России чаще всего встречается кирпичная кладка толщиной в 1,5 и 2 кирпича (380 и 510 мм). Такая толщина стен получалась согласно теплотехническому расчету, исходя из действующих нормативных данных и термического сопротивления теплопередачи кирпичной кладки с учетом расчетной температуры наружного воздуха в холодный период года в регионе проживания. Поэтому, исходя лишь из соображений по обеспечению необходимого сопротивления теплопередачи, а не несущей способностью конструкции стен убусловлена общепринятая толщина кирпичных стен в полтора и два кирпича. Для того чтобы малоэтажный дом был крепок и держал на себе крышу и снег, достаточно выполнить стены толщиной всего в один кирпич. В большинстве случаях при возведении стен дома для дополнительной теплоизоляции оставляли между ними воздушный зазор, ширина которого может достигать от 5 до 12 см. Наружная стена при этом возводится толщиной в пол кирпича, внутренняя — в один или полтора кирпича.

    Но в настоящее время с введением в 2013 году обновленных СНиПов и сводов Правил традиционная толщина стен в 1,5 или 2 кирпича является недостаточной для удовлетворения условий по тепловой защите и энергосбережению.

    Рис. Двойная кладка с воздушной прослойкой

    Поэтому с целью удовлетворения ужесточенным нормам СНиПов и одновременному снижения стоимости возведения стен в колодцевую кладку стали закладывать утеплитель. Рассчеты показывают, что колодцевая кладка с утеплителем внутри куда более эффективна по сравнению со сплошной, так как позволяет снизить расход кирпича на 40% и уменьшить массу стены на 28% при одновременном повышении термического сопротивления ограждающей конструкции. Колодцевая кладка с утеплителем получила широкое применяется в частном домостроении, а также при строительстве многоэтажных зданий с монолитным железобетонным каркасом.

    Преимущества кирпичной кладки с утеплителем:

    • Возможность обеспечения нормам СНиП по теплопотерям.
    • Уменьшение нагрузки на фундамент – снижение затрат на фундамент.
    • Итоговая экономичность строительства дома со стенами возведёнными методом колодцевой кладки.

    Недостатки облегченной кирпичной кладки:

    • Неоднородность конструкции.
    • Снижение капитальности стены.

    В качестве традиционных утеплителей для колодцевой кладки используются пенопласт и экструдированный пенополистирол в плитах. Данные утеплители заклыдываются во время строительства дома на этапе возведения стен. Главными недостатками данных плитных утеплителей является наличие межпанельных стыков, которые в последующем выполняют роль «мостиков» холода.

    Но что делать, если во время строительства стен Вашего дома не закладывался никакой утеплитель и оставлена только воздушная прослойка? Не расстраивайтесь, выход существует!

    Несмотря на то, что большинство традиционных теплоизоляционных материалов должны быть установлены во время строительства, заливка пенополиуретана (ППУ) в колодцевую кладку с воздушной прослойкой может быть произведена на любом этапе строительства в том числе и в уже закрытые полости, а также когда дом уже готов и эксплуатируется. Там где применение традиционных рулонных или плитных утеплителей попросту невозможно, а использование засыпных материалов (эковата, керамзит) может быть сопряжено с дополнительными работами и затратами на демонтаж кровли или части стены, заполнение межстеновых пустот методом заливки пенополиуретана (ППУ) производится без дорогостоящего разбора и демонтажа ограждающих конструкций и является самым оптимальным и эффективным способом утепления дома.

    Для того чтобы провести качественное утепление здания методом заливки пенополиуретана (ППУ) в полости стен, используются специальные компоненты ППУ, которые имеют замедленное время старта (время начала активного пенообразования). Это отдельные марки ППУ, которые обладают очень низкой теплопроводностью и их вспенивание начинается только через определенное время после тщательного перемешивания под высоким давлением, как правило через 20-40 сек. Это дает возможность компонентам ППУ опуститься еще в жидком виде в самый низ полости стены, равномерно распределиться там и уже потом вспениться заполняя собой все свободное пространство, как в горизонтальной так и в вертикальной плоскости.

    В настоящее время существует два основных способа заливки ППУ в межстеновое пространство (колодцевую кладку). Это заливка ППУ на этапе строительства в открытую полость и заполнение воздушной пустоты уже построенного дома через заливочные отверстия в кладке.

    Заливка пенополиуретана в открытое межстеновое пространство.

    Производится на этапе строительства при возведении стен дома. ППУ заливается сверху в открытую полость, но только после набора кирпичной кладки необходимой прочности, степень заполненности осуществляется визуально.

    Рис. Заливка ППУ в открытые полости

    Заливка пенополиуретана в закрытое межстеновое пространство производится через специальные отверстия диаметром 12-14 мм, просверленные во внешней или внутренней стене дома.

    Рис. Пистолет для заливки ППУ

    Заливочные отверстия равномерно распределяются по всей площади стены в шахматном порядке с шагом 50-100 см друг от друга.

    Рис. Расположение отверстий в стене для заливки ППУ

    Сначала осуществляют заливку ППУ через отверстия, расположенные в нижнем уровне, затем последовательно приступают к заполнению  более верхних уровней и так до самого верха. Контроль заполнения полости осуществляется специальным щупом, а также визуально через выдавливание пены из заливочных отверстий.

    Рис. Заливка ППУ в закрытые полости

    Заливка пенополиуретана (ППУ) в полость стены осуществляется с помощью профессионального оборудования высокого давления. Заливочная композиция в жидком виде под высоким давлением подается внутрь стены с помощью пистолета со специальной насадкой для заливки. Время старта у пенополиуретана для заливки увеличено до 20-40 секунд. Этого времени достаточно, чтобы материал в жидком виде успел равномерно распределится по дну полости. Затем происходит вспенивание, материал многократно увеличивается в объеме и заполняет все свободное пространство в стене,  Причем, подъем и рост пены происходит в направлении наименьшего сопротивления, то есть, пенополиуретан заполняет свободное воздушное пространсто в имеющейся полости и не выдавливает кирпичную кладку. По истечении 60-140 секунд пенополиуретан «застывает», образуя плотный, бесшовный и герметичный слой, который надежно защищает от тепловых потерь стены Вашего дома. В колодцевой кладке, как правило, не остается незаполненных частей, которые могли бы служить проводниками холода. Кроме того, заливка ППУ позволяет устранить все возможные зазоры, трещины и дефекты в каменной кладке, оставшиеся в результате проведения строительных работ.

    Также стоит заострить особое внимание на одном из самых популярных заблуждений по поводу заливки ППУ в полости, которое часто бытует среди пользователей в сети, а также часто задается в виде вопросов нашим специалистам. Это, якобы то, что ППУ при расширении и увеличении в объеме выдавливает кирпичи из кладки. Отвечаем, при условии набора кирпичной кладки 70% прочности, выдавливание и какие-либо деформации и разрушения кладки не происходят. Заполнение пустоты при заливке ППУ идет по пути наименьшего сопротивления, а именно замещение имеющейся воздушной прослойки пенополиуретаном. Согласитесь, что пенополиуретановой пене проще заполнить имеющуюся воздушную полость, чем выдавливать «схватившиеся» кирпичи из кладки! Ниже приводим фотографию кирпичной стены, где видно, что пенополиуретан вышел наружу стены из имеющихся отверстий и дефектов кирпичной кладки и тем самым загерметизировал все зазоры и трещины.

    На фото: выпирание ППУ из существующих дефектов кладки.

    Также одним из важных преимуществ заполнения межстеновых пустот пенополиуретаном (ППУ)является его эластичность и отсутствие усадки. В результате подвижек здания и его деформации не происходит растрескивания и усадки теплоизоляционного слоя ППУ, что гарантирует надежную и качественную теплоизоляцию на долгие десятилетия. Ниже представлены короткие видеоролики заполнения пенополиуретаном (ППУ) межстеновых пустот методом заливки в закрытую и открытые полости.

    Выполнение работ по заливке пенополиуретана (ППУ) в межстеновые пустоты и полости в Ростове-на-Дону и Южном федеральном округе.

    За более подробной информацией касательно заливки ППУ, пожалуйста, свяжитесь с нами любым удобным для Вас способом:

    • по телефонам: 8(863)248-30-24, 8(905)485-60-60;
    • по электронной почте: Этот e-mail адрес защищен от спам-ботов, для его просмотра у Вас должен быть включен Javascript
    • по WhatsAPP или Viber 

    Быстрый переход к другим видам работ:

    Трубы ППУ производит завод МосФлоулайн по ГОСТ 30732-2006

    Согласие на обработку персональных данных Настоящим в соответствии с Федеральным законом № 152-ФЗ «О персональных данных» от 27.07.2006 года свободно, своей волей и в своем интересе выражаю свое безусловное согласие на обработку моих персональных данных АО «ТИК» ИНН 5043062547 ОГРН 1175074013366, зарегистрированным в соответствии с законодательством РФ по адресу: 142214, Московская обл., г. Серпухов, ш. Северное, д. 1, офис 2 (далее по тексту — Оператор). Персональные данные — любая информация, относящаяся к определенному или определяемому на основании такой информации физическому лицу. Настоящее Согласие выдано мною на обработку следующих персональных данных: — Название компании — Телефон — Контактное лицо — E-mail Согласие дано Оператору для совершения следующих действий с моими персональными данными с использованием средств автоматизации и/или без использования таких средств: сбор, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), использование, обезличивание, а также осуществление любых иных действий, предусмотренных действующим законодательством РФ как неавтоматизированными, так и автоматизированными способами. Данное согласие дается Оператору для обработки моих персональных данных в следующих целях: — предоставление мне услуг/работ; — направление в мой адрес уведомлений, касающихся предоставляемых услуг/работ; — подготовка и направление ответов на мои запросы; — направление в мой адрес информации, в том числе рекламной, о мероприятиях/товарах/услугах/работах Оператора. Настоящее согласие действует до момента его отзыва путем направления соответствующего уведомления на электронный адрес [email protected] В случае отзыва мною согласия на обработку персональных данных Оператор вправе продолжить обработку персональных данных без моего согласия при наличии оснований, указанных в пунктах 2 – 11 части 1 статьи 6, части 2 статьи 10 и части 2 статьи 11 Федерального закона №152-ФЗ «О персональных данных» от 27.06.2006 г.

    Согласие на обработку персональных данных Настоящим в соответствии с Федеральным законом № 152-ФЗ «О персональных данных» от 27.07.2006 года свободно, своей волей и в своем интересе выражаю свое безусловное согласие на обработку моих персональных данных АО «ТИК» ИНН 5043062547 ОГРН 1175074013366, зарегистрированным в соответствии с законодательством РФ по адресу: 142214, Московская обл., г. Серпухов, ш. Северное, д. 1, офис 2 (далее по тексту — Оператор). Персональные данные — любая информация, относящаяся к определенному или определяемому на основании такой информации физическому лицу. Настоящее Согласие выдано мною на обработку следующих персональных данных: — Название компании — Телефон — Контактное лицо — E-mail Согласие дано Оператору для совершения следующих действий с моими персональными данными с использованием средств автоматизации и/или без использования таких средств: сбор, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), использование, обезличивание, а также осуществление любых иных действий, предусмотренных действующим законодательством РФ как неавтоматизированными, так и автоматизированными способами. Данное согласие дается Оператору для обработки моих персональных данных в следующих целях: — предоставление мне услуг/работ; — направление в мой адрес уведомлений, касающихся предоставляемых услуг/работ; — подготовка и направление ответов на мои запросы; — направление в мой адрес информации, в том числе рекламной, о мероприятиях/товарах/услугах/работах Оператора. Настоящее согласие действует до момента его отзыва путем направления соответствующего уведомления на электронный адрес [email protected] В случае отзыва мною согласия на обработку персональных данных Оператор вправе продолжить обработку персональных данных без моего согласия при наличии оснований, указанных в пунктах 2 – 11 части 1 статьи 6, части 2 статьи 10 и части 2 статьи 11 Федерального закона №152-ФЗ «О персональных данных» от 27.06.2006 г.

    Протеинфосфатаза 1 — обзор

    Структура и регуляция PP-1 и кальциневрина

    PP-1 и кальциневрин являются наиболее изученными фосфатазами в отношении как структуры, так и регуляции. Доменные структуры каталитических субъединиц PP-1 и кальциневрина изображены на рис. 4.14. PP-1 — белок 35–38 кДа; большая часть его последовательности образует каталитический домен; его С-конец является местом регуляторного фосфорилирования. Каталитические домены PP-1, PP-2A и кальциневрина очень гомологичны (Price and Mumby, 1999).

    Рисунок 4.14. Доменная структура каталитических субъединиц некоторых Ser / Thr фосфатаз.

    Три основных фосфопротеинфосфатазы, PP – 1, PP – 2A и кальциневрин, имеют гомологичные каталитические домены (розовый), но различаются по своим регуляторным участкам (зеленый) и свойствам.

    PP-1 и PP-2A обычно образуют комплексы в клетках со специфическими нацеливающими или регуляторными субъединицами (Price and Mumby, 1999; Hubbard and Cohen, 1993). Например, PP-1 прикрепляется к частицам гликогена в печени, миофибриллам в мышцах и неопознанным целевым субъединицам в головном мозге.Фосфорилирование целевой субъединицы PP-1 в печени высвобождает каталитическую субъединицу и приводит к снижению дефосфорилирования субстратов вблизи целевой субъединицы, поскольку локальная концентрация PP-1 снижается по мере его диффузии. Нацеливание на PP-1 также модулирует его регуляцию естественными ингибиторами. Когда PP-1 диссоциирует от нацеленных субъединиц, он становится восприимчивым к ингибированию ингибитором 2.

    Ингибирование PP-1 двумя другими ингибиторами, ингибитором 1 и его гомологом DARPP-32 (дофамин и цАМФ-регулируемый фосфопротеин, M r 32000), зависит от состояния фосфорилирования этих ингибиторов (Hemmings et al., 1984). Ингибитор 1 широко распространен в головном мозге, тогда как DARPP-32 в основном обнаруживается в средних шиповатых нейронах неостриатума и в их окончаниях в бледном шаре и черной субстанции. Оба белка ингибируют только после того, как они фосфорилируются PKA или PKG. PKA также увеличивает восприимчивость PP-1 к ингибированию, стимулируя его высвобождение из нацеливающих субъединиц. Поскольку субстраты для PKA и PP-1 частично перекрываются, скорость и степень фосфорилирования таких субстратов увеличиваются за счет способности PKA как катализировать их фосфорилирование, так и блокировать их дефосфорилирование.Ингибитор 1, DARPP-32 и ингибитор 2 являются селективными в отношении PP-1. Для этих фосфатаз доступны высокоселективные ингибиторы, способные проникать через клеточную мембрану. Окадаиновая кислота, природный продукт морских динофлагеллат, является промотором опухолей, но, в отличие от сложных эфиров форбола, она действует на PP-2A и PP-1, а не на PKC.

    Протеиновая фосфатаза 1 . Рентгеновская структура каталитической субъединицы PP-1, связанной с токсином микроцистином, ингибитором циклических пептидов, показывает, что PP-1 представляет собой компактный эллипсоид с гидрофобной и кислой поверхностями, образующими щель для связывания субстратов (Goldberg et al., 1995). PP-1 представляет собой металлофермент, для которого требуется наличие двух металлов в активном центре, которые, вероятно, принимают участие в электростатических взаимодействиях с фосфатом на субстратах, которые помогают катализировать гидролитическую реакцию. Фосфат будет располагаться на пересечении двух бороздок на поверхности фермента, где будет происходить связывание с аминокислотными остатками на субстрате. Такое связывание может быть заблокировано, когда фосфоингибитор 1 или микрокристаллический LR связываются с этой поверхностью. Такая же общая структура каталитического домена наблюдается в кальциневрине.

    Кальциневрин (PP-2B). Кальциневрин представляет собой Ca 2+ -кальмодулин-зависимую фосфатазу, которая сильно обогащена в головном мозге. Это гетеродимер с субъединицей A 60 кДа (CnA), который содержит N-концевой каталитический домен и C-концевой регуляторный домен, который включает аутоингибиторный сегмент, кальмодулин-связывающий домен и сайт связывания для 19-кДа. регуляторная субъединица B (CnB) (Rusnak, Mertz, 2000). CnB представляет собой кальмодулин-подобный Ca 2+ -связывающий белок, который связывается с шарнирной областью CnA.Регулирование кальциневрина происходит в этой области, потому что он контролирует доступ фосфопротеинов к каталитическому сайту. Некоторая активация кальциневрина достигается связыванием Ca 2+ с CnB. Более сильная активация достигается связыванием Ca 2+ -кальмодулина.

    Чувствительность кальциневрина и CaMKII к Ca 2+ -кальмодулину существенно различается. Слабые или низкочастотные стимулы могут избирательно активировать кальциневрин, тогда как сильные или высокочастотные стимулы активируют CaMKII и кальциневрин.Это различие может играть роль в двунаправленном контроле силы синапсов (депрессия против потенцирования) с помощью низко- и высокочастотной стимуляции (Lisman, 1994). (См. Также обсуждение LTP и LTD в главе 18.)

    Дополнительная регуляция может быть обеспечена взаимодействием этой шарнирной области с циклофилином и FK506-связывающим белком (FKBP), белками, которые связывают иммунодепрессанты циклоспорин и FK506, соответственно. FKBP широко распространен в головном мозге, а его распределение напоминает распределение кальциневрина.И FK506, и циклоспорин A проницаемы для мембран и являются сильнодействующими и селективными ингибиторами кальциневрина. Их называют иммунофилинами, потому что их способность блокировать важную роль кальциневрина в активации лимфоцитов делает их эффективными иммунодепрессантами. Рентгеновская структура кальциневрина в комплексе с FK506 выявляет тройной комплекс, в котором FK506 связан на границе раздела между FKBP и регуляторным доменом CnA. (Гриффит и др., 1995). CnB связывается с одной поверхностью расширенного регуляторного домена CnA, а FKBP-FK506 связывается с противоположной поверхностью.Комплекс FK506-FKBP зажат между регуляторным доменом и каталитическим сайтом и, вероятно, ингибирует кальциневрин, затрудняя доступ фосфопротеинов к каталитическому сайту. Неясно, взаимодействуют ли FKBP и кальциневрин физиологически через естественный лиганд, который функционирует подобно FK506, чтобы облегчить их взаимодействие.

    Фосфопротеин фосфатаза 1 — обзор

    Структура и регуляция PP-1 и кальциневрина

    PP-1 и кальциневрин являются наиболее изученными фосфатазами в отношении как структуры, так и регуляции.Доменные структуры каталитических субъединиц PP-1 и кальциневрина изображены на рис. 4.14. PP-1 — белок 35–38 кДа; большая часть его последовательности образует каталитический домен; его С-конец является местом регуляторного фосфорилирования. Каталитические домены PP-1, PP-2A и кальциневрина очень гомологичны (Price and Mumby, 1999).

    Рисунок 4.14. Доменная структура каталитических субъединиц некоторых Ser / Thr фосфатаз.

    Три основных фосфопротеинфосфатазы, PP – 1, PP – 2A и кальциневрин, имеют гомологичные каталитические домены (розовый), но различаются по своим регуляторным участкам (зеленый) и свойствам.

    PP-1 и PP-2A обычно образуют комплексы в клетках со специфическими нацеливающими или регуляторными субъединицами (Price and Mumby, 1999; Hubbard and Cohen, 1993). Например, PP-1 прикрепляется к частицам гликогена в печени, миофибриллам в мышцах и неопознанным целевым субъединицам в головном мозге. Фосфорилирование целевой субъединицы PP-1 в печени высвобождает каталитическую субъединицу и приводит к снижению дефосфорилирования субстратов вблизи целевой субъединицы, поскольку локальная концентрация PP-1 снижается по мере его диффузии.Нацеливание на PP-1 также модулирует его регуляцию естественными ингибиторами. Когда PP-1 диссоциирует от нацеленных субъединиц, он становится восприимчивым к ингибированию ингибитором 2.

    Ингибирование PP-1 двумя другими ингибиторами, ингибитором 1 и его гомологом DARPP-32 (дофамин и цАМФ-регулируемый фосфопротеин, M r 32000), зависит от состояния фосфорилирования этих ингибиторов (Hemmings et al., 1984). Ингибитор 1 широко распространен в головном мозге, тогда как DARPP-32 в основном обнаруживается в средних шиповатых нейронах неостриатума и в их окончаниях в бледном шаре и черной субстанции.Оба белка ингибируют только после того, как они фосфорилируются PKA или PKG. PKA также увеличивает восприимчивость PP-1 к ингибированию, стимулируя его высвобождение из нацеливающих субъединиц. Поскольку субстраты для PKA и PP-1 частично перекрываются, скорость и степень фосфорилирования таких субстратов увеличиваются за счет способности PKA как катализировать их фосфорилирование, так и блокировать их дефосфорилирование. Ингибитор 1, DARPP-32 и ингибитор 2 являются селективными в отношении PP-1. Для этих фосфатаз доступны высокоселективные ингибиторы, способные проникать через клеточную мембрану.Окадаиновая кислота, природный продукт морских динофлагеллат, является промотором опухолей, но, в отличие от сложных эфиров форбола, она действует на PP-2A и PP-1, а не на PKC.

    Протеиновая фосфатаза 1 . Рентгеновская структура каталитической субъединицы PP-1, связанной с токсином микроцистином, циклическим пептидным ингибитором, показывает, что PP-1 представляет собой компактный эллипсоид с гидрофобной и кислой поверхностями, образующими щель для связывания субстратов (Goldberg et al., 1995). PP-1 представляет собой металлофермент, для которого требуется наличие двух металлов в активном центре, которые, вероятно, принимают участие в электростатических взаимодействиях с фосфатом на субстратах, которые помогают катализировать гидролитическую реакцию.Фосфат будет располагаться на пересечении двух бороздок на поверхности фермента, где будет происходить связывание с аминокислотными остатками на субстрате. Такое связывание может быть заблокировано, когда фосфоингибитор 1 или микрокристаллический LR связываются с этой поверхностью. Такая же общая структура каталитического домена наблюдается в кальциневрине.

    Кальциневрин (PP-2B). Кальциневрин представляет собой Ca 2+ -кальмодулин-зависимую фосфатазу, которая сильно обогащена в головном мозге. Это гетеродимер с субъединицей A 60 кДа (CnA), который содержит N-концевой каталитический домен и C-концевой регуляторный домен, который включает аутоингибиторный сегмент, кальмодулин-связывающий домен и сайт связывания для 19-кДа. регуляторная субъединица B (CnB) (Rusnak, Mertz, 2000).CnB представляет собой кальмодулин-подобный Ca 2+ -связывающий белок, который связывается с шарнирной областью CnA. Регулирование кальциневрина происходит в этой области, потому что он контролирует доступ фосфопротеинов к каталитическому сайту. Некоторая активация кальциневрина достигается связыванием Ca 2+ с CnB. Более сильная активация достигается связыванием Ca 2+ -кальмодулина.

    Чувствительность кальциневрина и CaMKII к Ca 2+ -кальмодулину существенно различается. Слабые или низкочастотные стимулы могут избирательно активировать кальциневрин, тогда как сильные или высокочастотные стимулы активируют CaMKII и кальциневрин.Это различие может играть роль в двунаправленном контроле силы синапсов (депрессия против потенцирования) с помощью низко- и высокочастотной стимуляции (Lisman, 1994). (См. Также обсуждение LTP и LTD в главе 18.)

    Дополнительная регуляция может быть обеспечена взаимодействием этой шарнирной области с циклофилином и FK506-связывающим белком (FKBP), белками, которые связывают иммунодепрессанты циклоспорин и FK506, соответственно. FKBP широко распространен в головном мозге, а его распределение напоминает распределение кальциневрина.И FK506, и циклоспорин A проницаемы для мембран и являются сильнодействующими и селективными ингибиторами кальциневрина. Их называют иммунофилинами, потому что их способность блокировать важную роль кальциневрина в активации лимфоцитов делает их эффективными иммунодепрессантами. Рентгеновская структура кальциневрина в комплексе с FK506 выявляет тройной комплекс, в котором FK506 связан на границе раздела между FKBP и регуляторным доменом CnA. (Гриффит и др., 1995). CnB связывается с одной поверхностью расширенного регуляторного домена CnA, а FKBP-FK506 связывается с противоположной поверхностью.Комплекс FK506-FKBP зажат между регуляторным доменом и каталитическим сайтом и, вероятно, ингибирует кальциневрин, затрудняя доступ фосфопротеинов к каталитическому сайту. Неясно, взаимодействуют ли FKBP и кальциневрин физиологически через естественный лиганд, который функционирует подобно FK506, чтобы облегчить их взаимодействие.

    PP1-опосредованное дефосфорилирование фосфопротеинов на выходе из митоза контролируется ингибитором-1 и фосфорилированием PP1

  • 1

    Lew, D.J. & Kornbluth, S. Регуляторные роли циклинзависимого фосфорилирования киназы в контроле клеточного цикла. Curr. Opin. Cell Biol. 8 , 795–804 (1996).

    CAS Статья Google ученый

  • 2

    Аззам Р. и др. Фосфорилирование циклином B-Cdk лежит в основе высвобождения активатора митотического выхода Cdc14 из ядрышка. Наука 305 , 516–519 (2004).

    CAS Статья Google ученый

  • 3

    Амон, А.Десятилетие Cdc14 — личная точка зрения. FEBS J. 275 , 5774–5784 (2008).

    CAS Статья Google ученый

  • 4

    Queralt, E. & Uhlmann, F. Cdk-противодействующие фосфатазы разблокируют выход из митоза. Curr. Opin. Cell Biol. 20 , 661–668 (2008).

    CAS Статья Google ученый

  • 5

    Trautmann, S.И Макколлум, Д. Клеточный цикл: новые функции фосфатаз семейства Cdc14. Curr. Биол. 12 , R733–735 (2002).

    CAS Статья Google ученый

  • 6

    Акстон, Дж. М., Домбради, В., Коэн, П. Т. и Гловер, Д. М. Один из изоферментов протеинфосфатазы 1 в Drosophila важен для митоза. Cell 63 , 33–46 (1990).

    CAS Статья Google ученый

  • 7

    Бейлис, Дж.M. & Roeder, G. S. Выход пахитена контролируется обращением Mek1-зависимого фосфорилирования. Ячейка 101 , 211–221 (2000).

    CAS Статья Google ученый

  • 8

    Chen, F. et al. Множественные протеинфосфатазы необходимы для митоза у Drosophila . Curr. Биол. 17 , 293–303 (2007).

    Артикул Google ученый

  • 9

    Дунан, Дж.Х. и Моррис, Н. Р. Ген bimG Aspergillus nidulans , необходимый для завершения анафазы, кодирует гомолог фосфопротеин-фосфатазы млекопитающих 1. Cell 57 , 987–996 (1989).

    CAS Статья Google ученый

  • 10

    Che, S. et al. Активность фосфатазы в экстрактах ооцитов Xenopus предпочтительно дефосфорилирует эпитоп MPM-2. FEBS Lett. 424 , 225–233 (1998).

    CAS Статья Google ученый

  • 11

    Скуфиас, Д. А., Индорато, Р. Л., Лакруа, Ф., Панопулос, А. и Марголис, Р. Л. Митоз сохраняется в отсутствие активности Cdk1, когда протеолиз или активность протеинфосфатазы подавляется. J. Cell Biol. 179 , 671–685 (2007).

    CAS Статья Google ученый

  • 12

    Mochida, S.& Hunt, T. Кальциневрин необходим для высвобождения экстрактов яиц Xenopus из мейотической M фазы. Природа 449 , 336–340 (2007).

    CAS Статья Google ученый

  • 13

    Nishiyama, T., Yoshizaki, N., Kishimoto, T. и Ohsumi, K. Временная активация кальциневрина необходима для инициации эмбрионального развития у Xenopus laevis . Природа 449 , 341–345 (2007).

    CAS Статья Google ученый

  • 14

    Квон, Ю. Г., Ли, С. Ю., Чой, Ю., Грингард, П. и Нэрн, А. С. Зависимое от клеточного цикла фосфорилирование протеинфосфатазы 1 млекопитающих киназой cdc2. Proc. Natl Acad. Sci. USA 94 , 2168–2173 (1997).

    CAS Статья Google ученый

  • 15

    Dohadwala, M. et al. Фосфорилирование и инактивация протеинфосфатазы 1 циклин-зависимыми киназами. Proc. Natl Acad. Sci. USA 91 , 6408–6412 (1994).

    CAS Статья Google ученый

  • 16

    Wu, Q. et al. Роль Cdc2- и PP2A-опосредованной регуляции Emi2 в поддержании остановки спинномозговой жидкости. Curr. Биол. 17 , 213–224 (2007).

    CAS Статья Google ученый

  • 17

    Margolis, S. S. et al. Роль PP1 в Cdc2 / Cyclin B-опосредованной активации положительной обратной связи Cdc25. Мол. Биол. Ячейка 17 , 1779–1789 (2006).

    CAS Статья Google ученый

  • 18

    Margolis, S.S. et al. PP1-контроль вступления в М-фазу осуществляется посредством 14-3-3-регулируемого дефосфорилирования Cdc25. EMBO J. 22 , 5734–5745 (2003).

    CAS Статья Google ученый

  • 19

    Снайдер, Г. Л. и др. Фосфорилирование DARPP-32 и ингибитора протеинфосфатазы-1 в сосудистом сплетении крысы: регуляция другими факторами, кроме дофамина. J. Neurosci. 12 , 3071–3083 (1992).

    CAS Статья Google ученый

  • 20

    Ceulemans, H. & Bollen, M. Функциональное разнообразие протеинфосфатазы-1, клеточный экономайзер и кнопка сброса. Physiol. Ред. 84 , 1–39 (2004).

    CAS Статья Google ученый

  • 21

    Kotani, S. et al. PKA и MPF-активируемые поло-подобные киназы регулируют активность комплекса, способствующего анафазе, и прогрессию митоза. Мол. Ячейка 1 , 371–380 (1998).

    CAS Статья Google ученый

  • 22

    Stegmeier, F. & Amon, A. Закрытие митоза: функции фосфатазы Cdc14 и ее регуляция. Annu. Преподобный Жене. 38 , 203–232 (2004).

    CAS Статья Google ученый

  • 23

    El-Armouche, A. et al. Роль кальциневрина и протеинфосфатазы-2А в регуляции ингибитора фосфатазы-1 в сердечных миоцитах. Biochem. Биофиз. Res. Commun. 346 , 700–706 (2006).

    CAS Статья Google ученый

  • 24

    Хигучи, Э., Ниши, А., Хигаши, Х., Ито, Ю. и Като, Х. Фосфорилирование ингибиторов протеинфосфатазы-1, ингибитора-1 и DARPP-32 в мозговом веществе почек. Eur. J. Pharmacol. 408 , 107–116 (2000).

    CAS Статья Google ученый

  • 25

    Бибб, Дж.A. et al. Фосфорилирование ингибитора протеинфосфатазы-1 с помощью Cdk5. J. Biol. Chem. 276 , 14490–14497 (2001).

    CAS Статья Google ученый

  • 26

    Bianchi, M. & Villa-Moruzzi, E. Связывание дельта фосфатазы-1 с белком ретинобластомы pRb включает домены, которые включают остатки распознавания субстрата и связывающий мотив pRB. Biochem. Биофиз. Res. Commun. 280 , 1–3 (2001).

    CAS Статья Google ученый

  • 27

    Wolfe, B. A., McDonald, W. H., Yates, J. R., 3rd & Gould, K. L. Фосфорегуляция фосфатазы Cdc14 / Clp1 задерживает поздние митотические события в S . помбе . Dev. Ячейка 11 , 423–430 (2006).

    CAS Статья Google ученый

  • 28

    Casaletto, J. B. et al.Ингибирование комплекса, стимулирующего анафазу, убиквитин-лигазой Xnf7. J. Cell Biol. 169 , 61–71 (2005).

    CAS Статья Google ученый

  • 29

    Murray, A. W. Экстракты клеточного цикла. Methods Cell Biol. 36 , 581–605 (1991).

    CAS Статья Google ученый

  • 30

    Gustafson, E. L. et al. Иммуноцитохимическая локализация ингибитора фосфатазы-1 в головном мозге крыс. J. Comp. Neurol. 310 , 170–188 (1991).

    CAS Статья Google ученый

  • 31

    Снайдер, Г. Л. и др. Фосфорилирование DARPP-32 и ингибитора протеинфосфатазы-1 в сосудистом сплетении крысы: регуляция другими факторами, кроме дофамина. J. Neurosci. 12 , 3071–3083 (1992).

    CAS Статья Google ученый

  • Регулирование клеточной протеинфосфатазы-1 (PP1) фосфорилированием семейства CPI-17, ингибиторов PP1, активируемых С-киназой

    J Biol Chem.2009 Dec 18; 284 (51): 35273–35277.

    Масуми Это

    От кафедры молекулярной физиологии и биофизики и Онкологического центра Киммела, Университет Томаса Джефферсона, Филадельфия, Пенсильвания 19107

    От кафедры молекулярной физиологии и биофизики и Онкологического центра Киммеля, Университет Томаса Джефферсона, Филадельфия, 19107

    Copyright © 2009 Американское общество биохимии и молекулярной биологии, Inc. Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

    Abstract

    Регуляторная цепь, контролирующая клеточную протеинфосфатазу-1 (PP1), многочисленную группу Ser / Thr фосфатаз, включает фосфорилирование PP1-специфических белков-ингибиторов. Неисправности этих белков-ингибиторов связаны с множеством заболеваний, включая сердечно-сосудистые заболевания и рак. При фосфорилировании по Thr 38 белок-ингибитор PP1 размером 17 кДа, CPI-17, избирательно ингибирует специфическую форму PP1, фосфатазу легкой цепи миозина, которая преобразует множественные киназные сигналы в фосфорилирование миозина II и других белков.Здесь обсуждаются механизмы, лежащие в основе ингибирования PP1 и перекрестного взаимодействия киназы / PP1, опосредованного CPI-17 и родственными ему белками, PHI, KEPI и GBPI.

    Введение

    Взаимные активности протеинкиназ и фосфатаз определяют уровни фосфорилирования белков в клетках. PP1 2 дефосфорилирует фосфо-Ser / Thr остатки белков для регулирования множественных сигнальных путей в различных клеточных локусах (1, –3). Клеточный PP1 связан с регуляторными белками / субъединицами PP1 в их связывающем участке PP1, известном как мотив F RV X .Связывание регуляторных белков PP1, таким образом, придает субстратную специфичность и локализацию на клеточном PP1. Почти 100 полипептидов были идентифицированы как регуляторные белки PP1, и они объясняют широкий спектр функций PP1 (1, –3). Кроме того, эукариотические клетки экспрессируют несколько белков-ингибиторов PP1, которые играют важную роль в регуляции клеточного PP1. Первое поколение белков-ингибиторов PP1 включает ингибитор-1, ингибитор-2, DARPP32 и NIPP-1, которые сильно ингибируют свободную каталитическую субъединицу PP1, но эти белки-ингибиторы были гораздо менее эффективны в отношении очищенных холоферментов PP1, MLCP и гликогена. связаны PP1.Таким образом, считалось, что клеточные холоферменты PP1 подвергаются диссоциации субъединиц до ингибирования PP1 белками-ингибиторами (1, 2). Однако количество холоферментов PP1, которые действительно подвергаются диссоциации субъединиц в клетках, остается неясным.

    MLCP представляет собой тримерный холофермент PP1, состоящий из изоформы PP1∂ и регуляторного комплекса MYPT1 (также известного как MBS, M110) и дополнительной субъединицы 21 кДа, и жизненно важен для контроля клеточного фосфорилирования в ответ на различные сигналы (4). MYPT1 и PP1 связываются через сегмент MYPT1 KVKF, а также через его восьмиповторный анкириновый мотив в N-концевом домене (5).Связывания N-концевого домена из 300 остатков MYPT1 достаточно для аллостерической регуляции активности PP1. С-концевой домен MYPT1 напрямую связывается с субстратами, включая миозин и эзрин / радиксин / моэзин (4). Активность MLCP обратимо регулируется в ответ на различные сигналы. Например, в гладких мышцах активация рецептора, связанного с G-белком, ингибирует MLCP, что приводит к повышению чувствительности Ca 2+ к фосфорилированию и сокращению миозина, тогда как сигналы циклических нуклеотидов могут активировать MLCP, чтобы вызвать расслабление гладких мышц (6).Ингибирование MLCP происходит при фосфорилировании MYPT1 по Thr 696 и Thr 853 (4). С другой стороны, протеинкиназа G может активировать MLCP (7). Эти регуляторные сигналы зависят от изоформы MYPT1 (8), что указывает на важную роль MYPT1 в регуляции MLCP. Кроме того, мы идентифицировали белок-ингибитор MLCP, названный CPI-17, который преобразует сигналы G-белка в ингибирование MLCP (9, 10). На основании сходства последовательностей три гомолога CPI-17 в геноме человека, PHI, KEPI и GBPI, были охарактеризованы как ингибиторы PP1 (11, –13).Каждый член семейства CPI-17 несет домен PHIN, в котором последовательности> 41% идентичны CPI-17 ( A ). Действительно, все члены семейства CPI-17 сильно ингибируют активность MLCP, что указывает на новые пути ингибирования холофермента PP1. В этом мини-обзоре основное внимание будет уделено CPI-17 и его гомологам (аминокислотные последовательности которых значительно отличаются от других белков-ингибиторов PP1), выделены важные результаты исследований CPI-17 и обсуждена роль других членов семейства CPI-17 в регуляции активности PP1.

    Семейство CPI-17. A , схематическое изображение первичной структуры семейства CPI-17. Сайт ингибирующего фосфорилирования ( красный, ) расположен в консервативном домене PHIN (, голубые боксы, ). Светло-серые точки и , зеленые прямоугольники указывают дополнительные сайты фосфорилирования и PP1-связывающие мотивы, соответственно. B , карта электростатического потенциала поверхности семейства CPI-17. Поверхностная модель фосфо-CPI-17 была использована в качестве матрицы, а предполагаемые модели для других белков были созданы in silico на основе выравнивания последовательностей.Моделирование поверхности было выполнено Altif Laboratories (Токио, Япония).

    Структура и функция CPI-17

    Аминокислотная последовательность CPI-17

    Ген CPI-17 ( PPP1R14A , хромосома 19) кодирует полипептид из 147 остатков, в котором> 85% аминокислот идентичны у млекопитающих (10) ( A ). Вариант сплайсинга CPI-17 (CPI-17β), лишенный экзона 2, существует в клетках гладких мышц человека, хотя неизвестно, является ли эта форма физиологически значимой (см. Ниже) (14).Рыбки данио экспрессируют аналогичный ген, хотя неясно, с каким членом семейства CPI-17 этот генный продукт функционально связан. У плодовых мух, нематод и дрожжей не было обнаружено гомологичных генов, что позволяет предположить, что семейство CPI-17 возникло на поздней стадии эволюции. Фосфорилирование CPI-17 по Thr 38 необходимо и достаточно для превращения белка в мощный ингибитор MLCP (9, 10). Не обнаружено гомологии между семейством CPI-17 и другими классами ингибиторов PP1, такими как ингибитор-1 и ингибитор-2, хотя фосфорилирование также участвует в функции большинства других белков-ингибиторов PP1.Структура CPI-17 имеет три домена: N- и C-концевые хвосты и центральный домен PHIN из 86 остатков между остатками от 35 до 120 ( A ) (15). Последовательность, окружающая сайт ингибирующего фосфорилирования, характеризует семейство CPI-17 и является псевдопалиндромной, (основной) — (гидрофобной) -Thr- (гидрофобной) — (основной) (16). Tyr 41 , Asp 42 и Arg 43 CPI-17 необходимы для ингибирующей активности и также консервативны среди членов семейства CPI-17 (15).Замена Ala в CPI-17 на Tyr 41 ускоряет дефосфорилирование фосфо-Thr 38 , важность которого будет обсуждаться (15). В отличие от домена PHIN, N- и C-концевые хвостовые домены уникальны для каждого члена семейства CPI-17. Другие члены семейства CPI-17 действительно обладают предполагаемым PP1-связывающим мотивом RV X F, который расположен на N-концевых хвостах PHI, KEPI и GBPI ( A , зеленые прямоугольники ) (11, –13).

    Трехмерная структура CPI-17

    ЯМР-исследования в растворе выявили трехмерную структуру нефосфорилированных и фосфо-CPI-17 PHIN доменов (16).Структура домена PHIN CPI-17 состоит из петлевой структуры, охватывающей сайт фосфорилирования Thr 38 (P-петля), за которым следует пучок из четырех спиралей, который стабилизирует структуру P-петли ( A , ниже ) (16). показаны трехмерные структурные модели нефосфорилированного и фосфо-CPI-17. В нефосфорилированной форме две спаренные A / D- и B / C-спирали образуют V-образную структуру с P-петлей, расположенной между парными спиралями (, left ).При фосфорилировании Thr 38 P-петля становится более уязвимой для растворителя и при этом создает крутящий момент в A-спирали. Это закручивание A-спирали раскатывает A-B-петлю вверх, чтобы выровнять B / C-спирали параллельно A / D-спиралям (, центр ). Вновь выровненные четыре спирали затем стабилизируются через гидрофобное ядро, которое создается перегруппировкой. P-петля фосфо-CPI-17 теперь отображается на молекулярной поверхности, привязанной к Tyr 41 . Предположительно, якорная функция Tyr 41 необходима для предотвращения дефосфорилирования активного сайта MLCP.Фосфатная группа в Thr 38 не может быть заменена на Asp, который вызывает дислокацию P-петли с минимальным увеличением ингибирующей способности, или на Glu, который искажает общую структуру. Кроме того, замещение боковой цепи сульфоновой кислоты, производной цистеина, на Thr 38 не может имитировать фосфорилирование. Таким образом, фосфатная группа, по-видимому, играет особую роль в мощной ингибирующей активности CPI-17, помимо того, что является только триггером конформационных изменений. Вариант сплайсинга CPI-17β сохраняет P-петлю и пару A / D-спиралей, хотя неизвестно, может ли эта изоформа ингибировать PP1 или функционировать как доминантно-отрицательная форма в клетке.Основываясь на сходстве последовательностей в домене PHIN, структурная топология и, как таковая функция, вероятно, сохраняются для членов семейства CPI-17.

    Модель селективного ингибирования MLCP фосфо-CPI-17. После фосфорилирования Thr 38 , CPI-17 претерпевает конформационные изменения, которые приводят к перестройке четырех спиралей, A – D (, середина, ). Фосфо-CPI-17 присоединяется к активному центру MLCP и подавляет его активность ( справа ). Другие холоферменты PP1 могут дефосфорилировать фосфо-CPI-17 и нейтрализовать его ингибирующую способность. U-CPI-17 и P-CPI-17 , нефосфорилированный и фосфорилированный CPI-17, соответственно.

    Селективное ингибирование MLCP с помощью Phospho-CPI-17

    Phospho-CPI-17 селективно ингибирует комплекс MLCP со значением IC 50 ∼1 нм (17, 18). Как же тогда CPI-17 может распознавать только PP1, связанный с MYPT1, среди почти 100 других холоферментов PP1, существующих в клетках? иллюстрирует нашу текущую модель селективного ингибирования MLCP фосфо-CPI-17. PP1, связанный с MYPT1, не способен гидролизовать фосфо-Thr 38 CPI-17, поэтому фосфо-CPI-17 образует стабильный комплекс с MLCP (, слева, ).С другой стороны, другие холоферменты PP1 способны дефосфорилировать фосфо-CPI-17 и нейтрализовать его ингибирующую способность. Проще говоря, регуляторная субъединица PP1 определяет, является ли фосфо-CPI-17 ингибитором или субстратом PP1. Кинетический анализ предполагает, что смешанное ингибирование MLCP индуцируется фосфо-CPI-17 со значениями K i и K i ‘, равными 1,9 и 5,1 нм, соответственно (17). Действительно, компьютерное моделирование предсказывает прямой контакт между фосфо-CPI-17 и MYPT1 (, справа ), что может объяснить специфическое ингибирование MLCP с помощью CPI-17 (16). B иллюстрирует электростатический поверхностный потенциал фосфо-CPI-17 и предсказанные карты для других гомологов CPI-17, рассчитанные на основе выравнивания последовательностей. Поверхность стыковки CPI-17 ( B , слева ) состоит из положительно заряженных остатков, окружающих кислотный островок фосфо-Thr 38 ( голубая стрелка ). Положительно заряженные области вокруг фосфо-Thr 38 , по-видимому, дополняют кислотный кластер, образованный PP1 и доменом анкириновых повторов MYPT1 (5).Картина поверхностного потенциала варьируется в пределах семейства CPI-17, тогда как отрицательный заряд доминирует в моделях структур PHI-1 и KEPI, а положительный заряд группируется на краю GBPI ( B ). Различия в структуре стыковочной поверхности предполагают, что каждый гомолог CPI-17 избирательно контролирует конкретную подгруппу целевых холоферментов PP1 и клеточных событий.

    Роль CPI-17 в передаче сигналов клетками

    Киназы и фосфатазы, регулирующие CPI-17

    Множественные киназы и фосфатазы участвуют в регуляции фосфорилирования CPI-17.В гладких мышцах фосфорилирование CPI-17 происходит в ответ на стимуляцию агонистами через активацию PKC, ROCK и ILK (19, 20). Действительно, PKCα и PKCδ являются доминирующими киназами CPI-17 в экстрактах гладких мышц аорты свиньи (21). Кроме того, CPI-17 связывается с регуляторным доменом изоформ PKC, включая α, ϵ, λ, ζ и μ (22). Также известно, что киназа, взаимодействующая с застежкой-молнией, и киназа, активируемая p21, непосредственно фосфорилируют выделенный CPI-17 по Thr 38 (23, 24). Таким образом, ожидается, что CPI-17 будет функционировать как концентратор множественных сигналов киназы, которые контролируют активность MLCP.Например, стимуляция α 1 -адренергического рецептора вызывает двухфазное фосфорилирование CPI-17 посредством последовательной активации PKC и ROCK в гладких мышцах (дополнительный рис. 1) (25). Быстрая активация рецептора, связанного с G-белком, вызванная Ca 2+ -зависимой PKC вызывает острое фосфорилирование CPI-17, вызывая ингибирование MLCP, которое усиливает сигнал Ca 2+ / кальмодулин-зависимой киназы легкой цепи миозина. После отмены Ca 2+ замедленная и продолжительная активация ROCK поддерживает фосфорилирование CPI-17 и MYPT1, вызывая тоническое сокращение гладких мышц (25).Таким образом, комбинация сигналов киназ придает профиль генерации силы гладкой мускулатуры посредством фосфорилирования CPI-17. Фосфорилирование CPI-17 обратимо снижается в ответ на повышенные уровни цАМФ / цГМФ (26), которые ослабляют сигналы PKC и ROCK (27). Кроме того, лечение аналогом цГМФ, возможно, активирует неидентифицированную фосфатазу (ы), которая может дефосфорилировать CPI-17 (28). В нашей модели CPI-17 дефосфорилируется такими «другими» комплексами PP1 () (18). Кроме того, очищенные PP2A и PP2C способны дефосфорилировать CPI-17 (29), что указывает на возможное участие нескольких фосфатаз в регуляции фосфорилирования CPI-17.Интересно, что PKA, как известно, фосфорилирует и активирует PP2A в головном мозге (30), поэтому дефосфорилирование CPI-17 может происходить через цАМФ / цГМФ-активированный PP2A. Следует отметить, что высокая активность фосфатазы (-ов) CPI-17 может объяснить, почему фосфорилирование CPI-17 не может быть обнаружено в стимулированной тромбоксаном A 2 церебральной артерии у нормальной крысы (31) или в артериях брыжейки, стимулированных фенилэфрином, у генетически гипертензивных крысы (32). Помимо Thr 38 , очищенная PKC также фосфорилирует Ser 12 на N-конце CPI-17, тогда как Ca 2+ / кальмодулин-зависимая протеинкиназа II предпочтительно фосфорилирует Ser 130 на CPI-17. С-концевой хвост (9, 33).Фосфорилирование CPI-17 по Ser 128 также было обнаружено в экстрактах тканей головного мозга (33). Однако физиологическое значение этого дополнительного фосфорилирования на обоих хвостах еще предстоит исследовать. Однако нельзя сбрасывать со счетов возможность того, что эти сайты участвуют в регуляции других целевых подмножеств, как сообщается для фосфорилирования DARPP32 по Thr 34 и Thr 75 , что индуцирует ингибирование PP1 и PKA соответственно (34). .

    Экспрессия CPI-17

    CPI-17 экспрессируется преимущественно в зрелых гладких мышцах (10), и более высокие уровни присутствуют в тонических мышцах, таких как артерии (на 7 мкм), по сравнению с фазовыми мышцами, такими как подвздошная кишка, мочевой пузырь и семявыносящий проток (при 0.8 мкм) или клеток в неоинтимальных очагах (35, 36). CPI-17 также экспрессируется в сердечной мышце эмбриона, в которой экспрессируются белки-маркеры гладких мышц, но его экспрессия исчезает во взрослой ткани (36). Тромбоциты, нейроны, эндотелий и эпителий также экспрессируют CPI-17, роль которого в этих тканях будет обсуждаться (35, –37). Накапливающиеся данные свидетельствуют о корреляции между уровнем экспрессии CPI-17 и степенью опосредованной PKC силы, чувствительной к Ca 2+ . Селективная проницаемость гладкой мышечной ткани с помощью Triton X-100 устраняет сокращение, вызванное активацией PKC, а добавление рекомбинантного CPI-17 восстанавливает сокращение, опосредованное PKC (38).Степень сокращения гладких мышц, вызванного стимуляцией сложного эфира форбола, зависит от уровня экспрессии CPI-17 (35). Интересно, что CPI-17 отсутствует в тканях американских кур, выращиваемых на фермах, и как таковой представляет собой отличную модель гладких мышц, не содержащих CPI-17 (39). Стимуляция агонистами, форбол 12,13-дибутират или G-белками вызывает предельную степень сокращения гладкой мускулатуры аорты курицы, предполагая важность CPI-17 в сокращении гладких мышц, индуцированном агонистами (39).Кроме того, колебания сигналов CPI-17, как сообщается, возникают при патологических состояниях, таких как гипертония, астма, воспаление и диабет (40, –45). Например, экспрессия и фосфорилирование CPI-17 активируются при индуцированной гипоксией легочной гипертензии (40). Повышающая регуляция CPI-17 также обнаруживается в гладких мышцах дыхательных путей во время воспаления и в гладких мышцах мочевого пузыря при диабете (41, 45). Напротив, воспаление вызывает подавление CPI-17 в гладких мышцах кишечника параллельно со снижением мышечного тонуса (43).Как воспалительные сигналы запускают эту двунаправленную регуляцию CPI-17 в различных гладкомышечных тканях, остается неизвестным.

    CPI-17 в других типах клеток

    Обратимое фосфорилирование миозина участвует в контроле подвижности эндотелиальных клеток и активации тромбоцитов. CPI-17 в эндотелиальных клетках и тромбоцитах переводит активацию PKC и / или ROCK в ингибирование MLCP и фосфорилирование миозина II, как это наблюдается в гладких мышцах (46, 47). В нейронах Пуркинье CPI-17 участвует в длительной синаптической депрессии (37).Синаптическая депрессия клеток Пуркинье мозжечка происходит через PKC-опосредованную хроническую интернализацию рецептора AMPA в ответ на высвобождение глутамата. Нейтрализация эндогенного CPI-17 в клетках Пуркинье с использованием небольшой интерферирующей РНК или блокирующего антитела приводит к быстрому восстановлению мембранного тока при стимуляции глутаматом (37), предполагая, что активация PKC, индуцированная метаботропным рецептором Glu, вызывает фосфорилирование CPI-17 и последующее ингибирование MLCP. , таким образом поддерживая интернализацию рецептора AMPA (37).Кроме того, CPI-17 управляет пролиферацией клеток, активируя сигнальный путь митоген-активируемой протеинкиназы (48). Сигналы факторов роста вызывают фосфорилирование мерлина, продукта гена нейрофиброматоза 2 типа, что снимает ингибирование сигнала ERK1 / 2. Мерлин фосфорилируется подгруппой протеинкиназ, включая ROCK, p21-активированную киназу и PKC, которые также способны фосфорилировать CPI-17. Сверхэкспрессия CPI-17 снижает и повышает уровень фосфорилирования MLCP и мерлина, соответственно, и ослабляет активность мерлина по подавлению опухолей (48, 49).Более 90% раковых клеток происходят из эпителиальных клеток, в которых экспрессируются следовые количества CPI-17 (35, 36). Роль CPI-17 в нормальном эпителии еще предстоит исследовать.

    Функции других членов семейства CPI-17

    PHI

    И PHI-1, и PHI-2 являются продуктами PNG ( PPP1R14B ) (50). Первоначально PNG был обнаружен на хромосоме 11 как ген-кандидат, участвующий в множественной эндокринной неоплазии 1 типа, хотя более поздние исследования исключили эту возможность.В транскрипте PNG существуют две потенциальные инициирующие последовательности ATG (11, 50). Инициирование первого ATG дает полипептид из 203 остатков, названный PHI-2, тогда как другой ATG в рамке считывания инициирует трансляцию для полипептида из 147 остатков, PHI-1 ( A , красных треугольников ) (11). PHI-1 повсеместно и обильно экспрессируется в различных тканях и культивируемых клетках. Напротив, экспрессия PHI-2 ограничена мышечными тканями (11). Иммуногистохимический анализ показал значительную разницу между локализацией CPI-17 и PHI-1/2, при этом антитело, распознающее как PHI-1, так и PHI-2, сильно окрашивало эндотелий капилляров скелетных мышц и прилегающую к мембране область гладкомышечного слоя подвздошной кишки (51).Рекомбинантный PHI-1 ингибирует PP1 и очищенный комплекс MLCP при фосфорилировании по Thr 57 (11). Фосфорилированный PHI-1 вызывает сокращение гладкомышечных полосок с кожей (52). Однако ингибирующая способность PHI-1 в отношении комплекса MLCP (IC 50 = 50 нм) значительно ниже по сравнению с таковой у CPI-17 (IC 50 = 1 нм), что позволяет предположить новые целевые холоферменты PP1 для PHI- 1. Очищенные PKC и ROCK способны фосфорилировать PHI-1 по Thr 57 и другим неопределенным сайтам (52), тогда как ILK фосфорилирует PHI-1 исключительно по Thr 57 (52).Активация G-белков в гладкомышечных тканях вызывает фосфорилирование эндогенного PHI-1 (53, 54). С другой стороны, восстановление нефосфорилированного PHI-1 не восстанавливает вызванное сложным форболом сокращение гладких мышц цыпленка, не содержащего CPI-17 (39). Следовательно, PHI-1 не участвует в опосредованном PKC ингибировании MLCP. Эндотелиальная экспрессия PHI-1 участвует в миграции клеток (55). Эндогенный PHI-1 накапливается на переднем крае эндотелиальных клеток, а подавление гена PHI-1 может замедлять миграцию клеток.Интересно, что нокдаун PHI-1 не влияет на статус фосфорилирования белков-субстратов MLCP, таких как легкая цепь миозина и эзрин / радиксин / моэзин (55), предполагая, что PHI-1 контролирует новую подгруппу холоферментов PP1 в эндотелиальных клетках.

    KEPI и GBPI

    KEPI ( PPP1R14C , хромосома 6) был обнаружен как белок, который активируется в ткани мозга, выделенной от мышей, зависимых от морфина (12). Что касается аминокислотной последовательности, KEPI, по-видимому, более близок к PHI-1, чем к CPI-17.Фосфорилирования KEPI по Thr 75 с помощью PKC достаточно для превращения этого белка в мощный ингибитор PP1 (12). PP1-связывающий мотив (-KVFF-) существует в N-концевом хвосте KEPI ( A , зеленые прямоугольники ). Действительно, PP1 соосаждение с гранулами, конъюгированными с нефосфорилированным KEPI (56). Очищенные PKC и ILK фосфорилируют рекомбинантный KEPI по Thr 73 , сайту ингибирующего фосфорилирования (12, 57). Фосфо-KEPI ингибирует очищенный комплекс MLCP и изолированный PP1 со значениями IC 50 , равными 8 и 0.1 нм соответственно (57). Следовательно, фосфо-KEPI сильно ингибирует холофермент PP1, но N-концевая последовательность KVFF KEPI может влиять на его ингибирующую способность. Недавно KEPI был заново открыт в группе генов, которые подавляются в опухолевых клетках молочной железы, наряду с известным супрессором опухолей EGR1 (ген-1 раннего ответа на рост) (58). Эктопическая экспрессия KEPI в клетках MCF-7 восстанавливает экспрессию EGR1 и его нижележащих белков, таких как PTEN (гомолог фосфатазы тензин). Хотя и CPI-17, и KEPI участвуют в регуляции роста клеток, существует явный контраст в их нижестоящих сигналах, предполагая, что разные пулы целевых холоферментов PP1 существуют для каждого ингибитора (48, 58).GBPI ( PPP1R14D , хромосома 15) был обнаружен как гомолог KEPI (13). Ген транскрибирует два варианта сплайсинга, GBPI и GBPI-2 ( A ). GBPI включает интактный домен PHIN, последовательность которого на 35% идентична CPI-17. С другой стороны, специфическая для семенников мРНК GBPI-2 включает сдвиг рамки считывания в A-B-петле и как таковая вряд ли будет ингибировать PP1. GBPI, фосфорилированный PKC, ингибирует изолированный PP1 со значением IC 50 , равным 3 нМ. Фосфорилирование GBPI с помощью PKA устраняет его ингибирующую способность.PP1-связывающий мотив, KVHW, находится в N-концевом хвосте ( A , зеленые прямоугольники ), который необходим для ингибирования изолированной каталитической субъединицы PP1 (13). Способен ли GBPI ингибировать холоферменты PP1, еще предстоит проверить. Интересно, что GBPI усиливает активность PP2A после его фосфорилирования PKC (13).

    Клеточная регуляция голоферментов PP1 с помощью белков-ингибиторов PP1

    После открытия членов семейств CPI-17 и CPI-17 становится ясно, что ранее охарактеризованные белки-ингибиторы PP1 также участвуют в контроле клеточных голоферментов PP1 в отсутствие субъединицы диссоциация.Например, PP1 I-2 ингибирует комплекс PP1 и киназы, связывающей микротрубочки, Nek2, через консервативный C-концевой домен I-2 (59), который непосредственно стыкуется с активным центром PP1 в сокристалле. модель комплекса ПП1 · И-2 (60). Кроме того, ингибитор-1 и ингибитор-3 PP1 также ингибируют холоферменты PP1 (см. Ссылку 3). Таким образом, каждый белок-ингибитор PP1 может нацеливаться на конкретную подгруппу холоферментов PP1, и существует больше белков-ингибиторов PP1, которые передают сигналы киназы в фосфатазы, поскольку> 100 полипептидов действуют как регуляторные субъединицы PP1.Протеомный подход («ингибитом PP1») будет полезен для получения полного понимания конкретных комбинаций киназ, холоферментов PP1 и белков-ингибиторов (дополнительный рис. 2). Как обсуждается здесь, CPI-17, а также другие белки-ингибиторы PP1, играют жизненно важную роль в передаче сигнала, контролируя как амплитуду, так и продолжительность фосфорилирования. Дополнительные белки-ингибиторы PP1, несомненно, будут заново открыты как вызывающие заболевания гены и признаны новыми терапевтическими мишенями.

    * Эта работа была полностью или частично поддержана грантом HL083261 Национального института здравоохранения.Этот мини-обзор будет перепечатан в сборнике мини-обзоров 2009 г., который будет доступен в январе 2010 г.

    Он-лайн версия этой статьи (доступная на http://www.jbc.org) содержит дополнительные рисунки. 1 и 2.

    2 Используемые сокращения:

    PP1
    Ser / Thr протеинфосфатаза-1
    MLCP
    Фосфатаза легкой цепи миозина
    MYPT1
    Нацеленная на миозинфосфатаза субъединица-1 PPI-1
    Ингибитор CPI-17 90-k2 PPI-17 90-k2 кДа
    PHI
    Ингибитор холофермента PP1
    KEPI
    Ингибитор PP1, усиленный киназой C
    GBPI
    желудочно-кишечный и мозгоспецифический ингибитор PP1
    PHIN
    PP1 ингибитор холоэнзима 90C
    ROCK
    RhoA-активируемая киназа спиральной спирали
    ILK
    интегрин-связанная киназа
    PKA
    протеинкиназа A
    ERK1 / 2
    регулируемая внеклеточным сигналом киназа-1/2 PNG С-соседний ген
    I-2
    ингибитор-2.

    ССЫЛКИ

    5. Террак М., Керфф Ф., Лангсетмо К., Тао Т., Домингес Р. (2004) Nature 429, 780–784 [PubMed] [Google Scholar] 7. Суркс Х. К., Мочизуки Н., Касаи Ю., Джорджеску С. П., Тан К. М., Ито М., Линкольн Т. М., Мендельсон М. Э. (1999) Science 286, 1583–1587 [PubMed] [Google Scholar] 8. Ричардс К. Т., Огут О., Брозович Ф. В. (2002) J. Biol. Chem. 277, 4422–4427 [PubMed] [Google Scholar] 9. Это М., Омори Т., Судзуки М., Фуруя К., Морита Ф. (1995) J. Biochem. 118, 1104–1107 [PubMed] [Google Scholar] 10.Это М., Сенба С., Морита Ф., Ядзава М. (1997) FEBS Lett. 410, 356–360 [PubMed] [Google Scholar] 11. Это М., Каргинов А., Браутиган Д. Л. (1999) Биохимия 38, 16952–16957 [PubMed] [Google Scholar] 12. Лю К. Р., Чжан П. В., Чжэнь К., Вальтер Д., Ван Х. Б., Уль Г. Р. (2002) J. Biol. Chem. 277, 13312–13320 [PubMed] [Google Scholar] 14. Ямаваки К., Ито М., Мачида Х., Морики Н., Окамото Р., Исака Н., Шимпо Х., Кохда А., Окумура К., Хартсхорн Д. Дж., Накано Т. (2001) Biochem. Биофиз. Res. Commun.285, 1040–1105 [PubMed] [Google Scholar] 15. Hayashi Y., Senba S., Yazawa M., Brautigan D. L., Eto M. (2001) J. Biol. Chem. 276, 39858–39863 [PubMed] [Google Scholar] 16. Это М., Китадзава Т., Мацудзава Ф., Айкава С., Киркбрайд Дж. А., Исодзуми Н., Нисимура Ю., Браутиган Д.Л., Оки С.Ю. (2007) Структура 15, 1591–1602 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [ Google Scholar] 19. Китадзава Т., Это М., Вудсом Т. П., Браутиган Д. Л. (2000) J. Biol. Chem. 275, 9897–9900 [PubMed] [Google Scholar] 21. Это М., Китадзава Т., Yazawa M., Mukai H., Ono Y., Brautigan D. L. (2001) J. Biol. Chem. 276, 29072–29078 [PubMed] [Google Scholar] 22. Земликова Е., Йоханнес Ф. Дж., Айткен А., Дюбуа Т. (2004) Biochem. Биофиз. Res. Commun. 316, 39–47 [PubMed] [Google Scholar] 23. Макдональд Дж. А., Это М., Борман М. А., Браутиган Д. Л., Хейстед Т. А. Дж. (2001) FEBS Lett. 493, 91–94 [PubMed] [Google Scholar] 24. Такидзава Н., Кога Ю., Икебе М. (2002) Biochem. Биофиз. Res. Commun. 297, 773–778 [PubMed] [Google Scholar] 26. Эттер Э. Ф., Это М., Уордл Р. Л., Браутиган Д. Л., Мерфи Р. А. (2001) J. Biol. Chem. 276, 34681–34685 [PubMed] [Google Scholar] 33. Dubois T., Howell S., Zemlickova E., Learmonth M., Cronshaw A., Aitken A. (2003) Biochem. Биофиз. Res. Commun. 302, 186–192 [PubMed] [Google Scholar] 34. Бибб Дж. А., Снайдер Г. Л., Ниши А., Ян З., Мейер Л., Финберг А. А., Цай Л. Х., Квон Ю. Т., Жиро Дж. А., Черник А. Дж., Хуганир Р. Л., Хеммингс Х. С., младший, Нэрн А.С., Грингард П. (1999 г. ) Nature 402, 669–671 [PubMed] [Google Scholar] 37.Это М., Бок Р., Браутиган Д. Л., Линден Д. Дж. (2002) Neuron 36, 1145–1158 [PubMed] [Google Scholar] 40. Дакшинамурти С., Меллоу Л., Стивенс Н. Л. (2005) Pediatr. Пульмонол. 40, 398–407 [PubMed] [Google Scholar] 41. Сакаи Х., Чиба Ю., Хирано Т., Мисава М. (2005) Мол. Pharmacol. 68, 145–151 [PubMed] [Google Scholar] 42. Morin C., Sirois M., Echave V., Rousseau E. (2008) Am. J. Respir. Cell Mol. Биол. 39, 638–643 [PubMed] [Google Scholar] 43. Охама Т., Хори М., Сато К., Одзаки Х., Караки Х. (2003) Дж.Биол. Chem. 278, 48794–48804 [PubMed] [Google Scholar] 44. Xie Z., Su W., Guo Z., Pang H., Post S. R., Gong M. C. (2006) Cardiovasc. Res. 69, 491–501 [PubMed] [Google Scholar] 45. Чанг С., Гиполит Дж. А., ДиСанто М. Э., Чанголкар А., Вейн А. Дж., Чако С. (2006) Am. J. Physiol. Renal Physiol. 290, F650 – F656 [PubMed] [Google Scholar] 46. Колосова И. А., Ма С. Ф., Адышев Д. М., Ван П., Охба М., Натараджан В., Гарсия Дж. Г., Верин А. Д. (2004) Am. J. Physiol. Легочная клетка. Мол. Physiol. 287, L970 – L980 [PubMed] [Google Scholar] 47.Ватанабэ Ю., Ито М., Катаока Ю., Вада Х., Кояма М., Фенг Дж., Шику Х., Нисикава М. (2001) Blood 97, 3798–3805 [PubMed] [Google Scholar] 48. Джин Х., Сперка Т., Херрлих П., Моррисон Х. (2006) Nature 442, 576–579 [PubMed] [Google Scholar] 49. Турнисен К., Опиц И., Курц С., Ведер В., Стахел Р. А., Фелли-Боско Э. (2009) Рак легких 64, 140–147 [PubMed] [Google Scholar] 50. Лагеркранц Дж., Карсон Э., Ларссон К., Норденшельд М., Вебер Г. (1996) Genomics 31, 380–384 [PubMed] [Google Scholar] 51. Тунтас Н.А., Манделл Дж. У., Эверетт А. Д., Браутиган Д. Л. (2004) Histochem. Cell Biol. 121, 343–350 [PubMed] [Google Scholar] 53. Эль-Тухки А., Гивен А. М., Кочард А., Брозович Ф. В. (2005) FEBS Lett. 579, 4271–4277 [PubMed] [Google Scholar] 54. Пан Х., Го З., Се З., Су В., Гонг М. С. (2006) Am. J. Physiol. Cell Physiol. 290, C892 – C899 [PubMed] [Google Scholar] 56. Гонг Дж. П., Лю К. Р., Чжан П. В., Ван Ю., Уль Г. Р. (2005) Neuroscience 132, 713–727 [PubMed] [Google Scholar] 57. Эрдоди Ф., Кисс Э., Уолш М.П., Стефанссон Б., Дэн Дж. Т., Это М., Браутиган Д. Л., Хартшорн Д. Дж. (2003) Biochem. Биофиз. Res. Commun. 306, 382–387 [PubMed] [Google Scholar] 58. Венцель К., Даскалоу К., Херсе Ф., Зейтц С., Захариас У., Шенк Дж. А., Шульц Х., Хубнер Н., Мишель Б., Шлаг П. М., Остерзил К. Дж., Озчелик К., Шернек С., Джандриг Б. (2007) Биол. Chem. 388, 489–495 [PubMed] [Google Scholar] 59. Это М., Эллиотт Э., Прикетт Т. Д., Браутиган Д. Л. (2002) J. Biol. Chem. 277, 44013–44020 [PubMed] [Google Scholar] 60.Херли Т. Д., Ян Дж., Чжан Л., Гудвин К. Д., Цзоу К., Кортез М., Дункер А. К., Де Паоли-Роуч А. А. (2007) J. Biol. Chem. 282, 28874–28883 [PubMed] [Google Scholar]

    Молекулярная основа субстратной специфичности холофермента фосфатазы Phactr1 / PP1

    Сводка приемки:

    Ваше открытие, что связанная стыковочная субъединица PP1 способна придавать специфичность первичной последовательности для дефосфорилирования мишени PP1, является важным достижением в нашем понимании того, как относительно неспецифическая каталитическая субъединица фосфатазы PP1 может приобретать специфичность фосфопротеинового целевого сайта.

    Письмо-решение после экспертной оценки:

    Благодарим вас за отправку вашей статьи «Молекулярные основы субстратной специфичности холофермента фосфатазы Phactr1 / PP1» на рассмотрение eLife . Ваша статья была рассмотрена тремя рецензентами, в том числе Тони Хантером в качестве редактора-рецензента и рецензентом №1, а оценку контролировал Джонатан Купер в качестве старшего редактора. Следующее лицо, участвовавшее в рассмотрении вашей заявки, согласилось раскрыть свою личность: Дэвид Барфорд (рецензент №2).

    Рецензенты обсудили рецензии друг с другом, и редактор-рецензент подготовил это решение, чтобы помочь вам подготовить исправленную заявку.

    Мы хотели бы обратить ваше внимание на изменения в нашей политике пересмотра, которые мы внесли в ответ на COVID-19 (https://elifesciences.org/articles/57162). В частности, мы просим редакторов без промедления принять рукописи, подобные вашей, которые, по их мнению, могут соответствовать статьям eLife без дополнительных данных, даже если они считают, что они сделают рукопись более сильной.Таким образом, изменения, запрошенные ниже, касаются только ясности и представления.

    Все рецензенты очень положительно оценили статью и рекомендуют публикацию в eLife . Открытие того, что связанная вспомогательная субъединица PP1 способна придавать специфичность первичной последовательности для дефосфорилирования мишени PP1, является важным достижением в нашем понимании того, как неспецифическая каталитическая субъединица PP1 может приобретать субстратную специфичность.

    Рецензент № 1:

    Это отличная статья, описывающая кристаллические структуры с высоким разрешением комплекса между Phactr1, нейрональным активатором PP1, регулируемым G-ctin, и протеинфосфатазой 1 pSer / Thr без связанного пептидного субстрата или со связанным пептидным субстратом, что дает новое важное понимание того, как Субъединица Phactr1 обеспечивает субстратную специфичность фосфатазы PP1.Чтобы понять, как Phactr1 обеспечивает субстратную специфичность для PP1, они решили кристаллические структуры соответствующего фрагмента Phactr1, связанного с PP1c, которые показали, что в холоферментном комплексе связывание Phactr1 создает длинную комбинаторную гидрофобную бороздку, которая может представлять расширенную целевую pSer / Thr пептидная последовательность активного сайта, которая также содержала два иона Mn 2+ и свободный фосфат. В структурах выявлено четыре отдельных контакта по мотивам между фрагментом Phactr1 и каталитической субъединицей PP1 — RVxF-φφ-R-W.Чтобы идентифицировать новые Phactr1 / PP1-специфические субстраты, они использовали фосфопротеомный анализ клеток NIH 3T3, индуцирующих экспрессию активирующего мутанта Phactr1xxx PP1, а также сравнили нейроны мыши WT и Phactr1 KO для идентификации нейрональных специфических субстратов для Phactr1 / PP1, выявив преобладание субстратных белков. участвуют в регуляции актинового цитоскелета, три из которых IRSp53 pS455, спектрин αII pS1031 и афадин pS1275 были подтверждены путем создания фосфоспецифических антител. Это исследование фосфозита субстрата Phactr1 / PP1 также позволило им определить предпочтения первичной последовательности.Чтобы точно узнать, как целевые фосфопептидные субстраты связываются с этой комбинаторной бороздкой, они решили структуры Phactr1 / PP1 со связанным пептидом-продуктом фосфатазы, полученным либо из IRSp53 (449-465), либо из спектрина αII (1025-1039), привязанного через линкер к PP1 (7-304), который, в свою очередь, был связан с фрагментом Phactr1; Эти структуры показали, что пептиды субстрата были связаны в активном центре вместе со свободной молекулой фосфата. В этих структурах фосфат был связан перевернутым образом по сравнению с фосфатом в структуре холофермента и, следовательно, представляет собой комплексы фермент-продукт.Структуры показывают, как расширенная связывающая бороздка обеспечивает специфичность первичной фосфопептидной последовательности. Был проведен ряд исследований мутагенеза, чтобы установить важность наблюдаемых взаимодействий, участвующих в Phactr1 и связывании субстрата с PP1. Они также решили другую структуру PP1-Phactr1 с фосфомиметическим субстратным пептидом IRSp53 Glu455, связанным с PP1, и, что интересно, обнаружили, что Glu455 не стыковался с активным центром, а вместо этого пептид сдвинул один регистр, так что Thr546 и ион фосфата были стыкованы. там, что согласуется с тем, что глутамат является плохим фосфомиметиком.

    Открытие того, что связанная стыковочная субъединица PP1 способна придавать специфичность первичной последовательности для дефосфорилирования мишени PP1, является важным достижением в нашем понимании того, как неспецифическая каталитическая субъединица PP1 может приобретать субстратную специфичность. Это очень всестороннее исследование, и у меня нет существенных комментариев.

    Рецензент № 2:

    Эта рукопись Treisman с коллегами исследует молекулярные основы специфичности Ser / Thr PP-семейства фосфатазы PP1.Вопрос о том, обладают ли холоэнзимы PP1 внутренней субстратной специфичностью как таковой, и если да, то какова молекулярная основа этой специфичности, давно является важным вопросом. В этом отношении фосфатазы PPP в частности и все семейство фосфатаз в целом гораздо менее изучены, чем протеинкиназы. Это исследование представляет собой демонстрацию силы, в которой эти вопросы рассматриваются окончательно, тщательно и энергично. Это знаковое исследование для данной области. Предыдущая работа определила, как каталитическая субъединица PP1 (PP1c) взаимодействует с короткими последовательностями мотивов для нацеливания PP1c на регуляторные субъединицы и субстраты, тем самым обеспечивая некоторую степень специфичности на уровне субстрата и клеточной локализации.Однако было неизвестно, как субстраты связываются с PP1 или как регуляторные субъединицы / кофакторы вносят вклад и модулируют структуру сайта связывания субстрата на голоферменте PP1.

    Авт. Впервые определили кристаллическую структуру PP1 в комплексе с PP1-областью Phactr1, обогащенного нейронами кофактора PP1, контролируемого G-actin. Это показало, что Phactr1 связывает PP1 посредством множества мотивов, включая RVxF, мотив phi-phi, новый мотив Trp и мотив Arg, авторы описывают это как строку RVxF-phi-phi-R-W.Кроме того, с PP1 контактирует амфипатическая спираль из 20 остатков. Эти взаимодействия реконструируют гидрофобную бороздку PP1 и создают новый составной сайт связывания, смежный с каталитическим сайтом. Leu519 мотива RVxF также связывается с G-актином, объясняя, как связывание G-актина с белками Phactr регулирует активность PP1. Составной активный центр имеет ярко выраженный основной ободок. Роль многих ключевых взаимодействующих остатков была подтверждена исследованиями мутагенеза / аффинности.

    Авт. Использовали активированное производное Phactr1, которое конститутивно связывает и активирует PP1 в клетках.Это позволило им идентифицировать субстраты PP1-Phactr1. Интересно, что эти субстраты показывают определенную консенсусную последовательность дефосфорилирования: основные остатки на N-конце pSer / Thr, за которыми следуют кислотные остатки и алифатические остатки (Leu) на P4 и P5. Кристаллические структуры пептидов с очень высоким разрешением, смоделированные на основе последовательностей дефосфорилирования IRSp53 и спектрина (слитого с PP1c), были определены для получения структурного обоснования субстратной специфичности комплексов PP1-Phactr1. Эти структуры элегантно объясняют предпочтение кислотных остатков на С-конце по отношению к pSer / Thr через контакты с основным краем Phactr1 и то, как остатки Leu на + p4 / p5 взаимодействуют с гидрофобным карманом, образованным как из PP1c, так и из Phactr1.Неожиданно мотив diLeu субстратов может быть сдвинут на один остаток относительно pSer / Thr для связывания в гидрофобном кармане. Это иллюстрирует степень пластичности распознавания субстратов комплексами PP1-Phactr1.

    В качестве бонуса авторы также захватили фосфат на каталитическом сайте в своих комплексах Phactr1 / PP1-IRSp53 / спектрин. Интересно, что геометрия фосфата инвертирована относительно холофермента (без субстрата). Более поздняя геометрия подобна той, что была обнаружена в более ранних исследованиях PP1c, которая, вероятно, представляет, как фосфат нефосфорилированного pSer / Thr будет связываться.Таким образом, авторы случайно зафиксировали дефосфорилированный продукт, показывающий фосфат в перевернутой конфигурации. Чрезвычайно высокое разрешение их структур позволяет точно определить местонахождение атомов кислорода, поэтому эта работа окончательно поддерживает модель катализа PP1, предложенную около 25 лет назад.

    Все кристаллические структуры исключительного качества, один комплекс определен с разрешением 1,09 А, что, вероятно, является самым высоким для любой фосфатазы (и подавляющего большинства кристаллических структур).

    В целом это отличное и очень интересное исследование, заслуживающее публикации в eLife .

    1) Единственный научный вопрос — это MSA на рисунке 1 — приложение к рисунку 1A. Авторы выровняли паралоги Phactr со вставкой в ​​Phactr2 и Phactr3 в позиции «V» мотива «RVxF». Это крайне маловероятно, потому что остаток Val имеет решающее значение для мотива. Выравнивание на основе структуры могло бы выровнять Leu «IL», предшествующего «RF», с валином. Это можно проверить экспериментально, но это не является условием для публикации данной статьи.

    Рецензент № 3:

    Это прекрасное сочетание структурной биологии и фосфопротеомики, которые взаимодействуют, чтобы очертить механизм действия нацеленной субъединицы PP1. Они определяют, как Phactr1 связывается с PP1, структурой, подтвержденной различными исследованиями мутагенеза. Phosphoproteomics идентифицирует ряд субстратов, которые имеют биологический смысл, и они подтверждают небольшое количество фосфоэпитопных антител. Они способны кристаллизовать два субстратных пептида в комплексе Phactr1-PP1 с помощью привязки, что вызывает проблемы принудительного изменения ориентации.Однако пептидные взаимодействия подтверждаются исследованиями мутагенеза и высоким сходством взаимодействий между двумя независимыми пептидами.

    Следующим шагом будет привязка изменений фосфорилирования в определенных участках, идентифицированных к клеточным фенотипам, чего здесь не удалось достичь. Но это не умаляет очень амбициозной и информативной рукописи, которая будет представлять широкий интерес для тех, кто задумывается о том, как контролируется фосфорилирование и как фосфатазы находят свои субстраты.

    https://doi.org/10.7554/eLife.61509.sa1

    НАД ПП-1

    NAD PP-1 — фонокорректор MM

    Для бюджетных аналогов

    [Итальянская версия]

    Изделие: Фонокорректор NAD PP-1
    Производитель: NAD Electronics Co.
    Прибл. цена: 100 долларов США — 75 евро
    Рецензент: Лючио Кадедду

    Фонокорректор NAD PP-1

    Интегральные усилители с фонокорректорами в наши дни становятся довольно редкостью.Причина проста: многие «новые» аудиофилы владеют только CD-плеером и компакт-дисками … так в чем же причина платить за входной каскад, который никогда не будет использоваться?
    НО !!! Есть еще много пластинок и вертушек, и даже новички открывают для себя волшебный звук старых добрых виниловых дисков. Следовательно, отдельные фонокорректоры становятся довольно популярными и «необходимыми».
    Проблема в том, что отдельные фонокорректоры обычно довольно дороги и предназначены только для хай-энда. Чтобы удовлетворить потребности рынка, несколько компаний Hi-Fi начали проектировать и делать доступные отдельные фонокорректоры: QED DS-1, Rotel, KAB PH-1 (см. Обзор здесь, на TNT-Audio) и…НАД. Представляем вам фонокорректор NAD PP-1 MM: недорогой, ориентированный на аудиофилов минималистский фонокорректор MM на базе операционных усилителей с внешним источником питания и качественными кабелями с позолоченными RCA.
    Больше нечего сказать: маленький СТАЛЬНЫЙ черный ящик с двумя входами RCA и внутренним припаянным выходным кабелем (выбор «sano»). Светодиод, который загорается, когда устройство подключено к сети через внешний источник питания (15 В постоянного тока) при отсутствии переключателя включения / выключения: PP-1 предназначен для постоянного включения.

    Технические характеристики

    • Входное сопротивление: 47 кОм + 220 пФ
    • Входная чувствительность для 200 мВ на выходе: 2,5 мВ
    • Соотношение сигнал / шум: 78 дБ (взвешенный A) — 72 (невзвешенный)
    • Перегрузка входа при 20 Гц: 55 мВ
    • Перегрузка на входе при 1 кГц: 63 мВ
    • Перегрузка входа при 20 кГц: 580 мВ
    • THD (20-20 кГц): 0,04%
    • Точность RIAA: +/- 0,5 дБ
    • Размер (Ш x В x Г): 135 x 35 x 70 мм (5,31 x 1,38 x 2,76 дюйма)
    • Вес: 0.45 кг (1 фунт) (без блока питания)

    PP … Включите!

    NAD имеет хорошую репутацию производителя хорошо звучащих фонокорректоров — я до сих пор помню, насколько хорош был один из знаменитых интегрированных усилителей 3020 — поэтому мне было любопытно послушать этот небольшой PP-1.
    Прежде всего, позвольте мне сказать, что он очень тихий, возможно, благодаря внешнему блоку питания, соотношение сигнал / шум действительно очень хорошее для этой цены.
    При приклеивании ушей к сабвуферам можно было обнаружить лишь небольшой гул с частотой 50 Гц 🙂

    Во-первых, хорошие новости: у PP-1 действительно приятные средние и высокие частоты: голоса воспроизводятся естественно, возможно, немного светлее, но все же с большим количеством деталей.Кажется, что мужским голосам не хватает «тела», но видимые искажения кажутся очень низкими.
    PP-1 также демонстрирует хорошую способность исследовать музыкальную программу, не совсем объектив с увеличением … но определенно желанный и неожиданный подарок, учитывая цену.
    Тогда плохие новости: давайте поговорим о средних и низких частотах. Например, среднему басу не хватает некоторой артикуляции электрических басовых нот, и кажется, что басист всегда играет одну и ту же струну. Даже барабаны кажутся немного «липкими», в то время как в целом ощущается «громкость» звука.
    Глубина диапазона низких частот достаточна для бюджетных систем и полочных громкоговорителей … покупайте однозначно и четко ограниченно с большими напольными колонками.
    Глядя на музыкальное оформление PP-1 в целом, возникает ощущение очень «компактного» звука, чистого, неискаженного, но определенно не «заводного».

    Динамика

    Что вы ожидаете от фонокорректора за 100 долларов? Чудеса? Я бы не стал. И, действительно, динамические характеристики PP-1 просто удовлетворительные / средние, некоторые серьезные компрессии отчетливо слышны, в то время как «темп» немного медленный.
    Несмотря на это, вы все равно можете получить хороший бас. Но здесь возникает другая проблема: басовые партии звучат «не по времени» по сравнению с остальным звуковым спектром, поэтому вам трудно следовать ритму. С другой стороны, микродинамика
    неплохая, благодаря хорошей производительности высокого диапазона.

    3D-изображения

    Да ладно, вы действительно ожидаете какого-либо «имиджа» от бюджетной фонокоррекции? Честно говоря, PP-1 действительно создает звуковую сцену, но глубина изображения практически отсутствует, а ширина простирается между динамиками и даже немного дальше.НО!!! Не устанавливайте громкоговорители слишком далеко друг от друга, иначе вы увидите широкую «черную дыру» посередине между ними.
    И да, звук остается в основном ВНУТРИ динамиков, как и ожидалось. В любом случае, я думаю, потенциальные покупатели PP-1 не будут особо беспокоиться о изображениях.

    Советы

    Использовать PP-1 очень просто: подключите кабели и сеть, и все готово. Обязательно подключите его выход к любому входу AUX (линейного уровня) интегрированного усилителя или предусилителя.Потом оставьте его постоянно ВКЛЮЧЕННЫМ: после первых 15 минут начинает прилично звучать … до этого … просто ужасно.
    Поместите его на поверхность без вибраций (возможно, с демпфированием), фонокорректоры являются микрофонными.

    Жалобы

    Не к чему придраться к изготовлению и конструкции. Что касается звука … ну, он стоит 100 долларов, поэтому не стоит ожидать, что его звук будет конкурировать с, например, Lehmann Black Cube.
    Иногда медленный, немного «громкий» без реального изображения.

    Выводы

    По сравнению со стандартами других журналов это может показаться отрицательным обзором, но, смею сказать, это не так. Позвольте мне объяснить, почему: PP-1 — красивый, хорошо собранный фонокорректор по честной цене, один из самых дешевых на рынке.
    Да, он не заставляет вас вставать и танцевать перед динамиками, но он все же дает хороший звук, какой вы получаете от встроенных фонокорректоров хороших интегрированных аудиофилов (NAD, Rotel и т. Д.).
    Итак, если в вашем усилителе есть только линейные входы, у вас есть приличная комбинация проигрывателя и тележки (ничего особенного), и вам отчаянно нужен простой, доступный и недорогой фонокорректор, NAD PP-1 — это «один» способ идти.Не единственный, конечно, но решать тут всегда на ваше ухо.

    © Copyright 2000 Лючио Кадедду — https://www.tnt-audio.com

    Как распечатать эту статью

    AnythingTruck.com, Склад запчастей и аксессуаров для грузовиков и прицепов

    Подробнее о продукте

    Особые примечания
    нет
    Описание продукта
    Производитель: Bendix
    Номер детали: 284726N
    Комплект двухтактного регулирующего клапана PP-1
    Давление выпуска: 40 фунтов на кв. Дюйм
    Порт подачи: 1/8 «NPT
    Порт нагнетания: 1/8 «NPT (2)
    Выпускной порт: 1/8 «NPT
    Размер вала: 3/8 дюйма
    В комплект
    входят клапан 276567 PP-1, желтая кнопка 248502, штифт 296962N и монтажная гайка 239357N

    Регулирующие клапаны Push-Pull чаще всего устанавливаются на приборной панели автомобиля и используются для различных управляющих приложений.PP-1 и PP-2 чувствительны к давлению, нормально закрыты, управление вкл. / Выкл. клапаны, которые автоматически возвращаются в положение выпуска (кнопка выключена) при понижении давления питания. ниже необходимого минимума. Их можно вручную перевести в любое положение при пониженном давлении. выше необходимого минимума. Настройки давления, конфигурация кнопок и надписи могут отличаться. в зависимости от приложения.

    PP-1 обычно используется для управления стояночным и аварийным тормозами. Этот клапан также используется в сочетании с клапаном защиты трактора ТП-2 в одноконтурных пневмосистемах трактора до 121.

    Перекрестные ссылки: 284726, 284726N, 060-284726N, 78113418, 49

    1, 21339532, 2306994, 25061200188, 5107563, D2HS2A062BA, D2HS2A622BA, D2HSBA622BA, 825687, 10130547, 15572831, 5300758001, 78113418, 86883028, KN20021, 459876, 479301440A, K-295-97, K29597, 794167C1, S-A562, SA562, 15572831, 5JA569,

    281, 1736602, 801063, 284726BXW, 54233031P, 440338, 61130317, 1576016, V1576016, 1201036
    Перечень перекрестных ссылок означает, что этот клапан является подходящей заменой для указанных номеров деталей.Могут потребоваться некоторые изменения в трубопроводе воздуховода.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *